Nguyên lý và đặc điểm cấu trúc của kính hiển vi huỳnh quang
Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng nguồn sáng điểm hiệu quả cao để phát ra một bước sóng ánh sáng nhất định (như tia cực tím 3650 hoặc ánh sáng xanh tím 4200) thông qua hệ thống lọc màu làm ánh sáng kích thích, kích thích các chất huỳnh quang trong mẫu vật phát ra nhiều màu huỳnh quang khác nhau, sau đó quan sát qua độ phóng đại của thấu kính vật kính và thị kính. Bằng cách này, ngay cả với huỳnh quang yếu trên nền mạnh, nó vẫn dễ dàng được nhận biết và có độ nhạy cao. Nó chủ yếu được sử dụng để nghiên cứu cấu trúc, chức năng và thành phần hóa học của tế bào. Cấu tạo cơ bản của kính hiển vi huỳnh quang bao gồm kính hiển vi quang học thông thường và một số phụ kiện như nguồn sáng huỳnh quang, bộ lọc kích thích, bộ tách chùm tia hai màu và bộ lọc chặn. Nguồn sáng huỳnh quang - thường sử dụng đèn thủy ngân áp suất cực cao (50-200W), có thể phát ra ánh sáng có nhiều bước sóng khác nhau, nhưng mỗi chất huỳnh quang đều có bước sóng ánh sáng kích thích tạo ra huỳnh quang mạnh nhất. Do đó, cần thêm các bộ lọc kích thích (thường là bộ lọc kích thích tia cực tím, tím, xanh lam và xanh lục) để chỉ cho phép một bước sóng ánh sáng kích thích nhất định đi qua và chiếu xạ mẫu vật, đồng thời hấp thụ tất cả các ánh sáng khác. Sau khi được chiếu bằng ánh sáng kích thích, mỗi chất phát ra huỳnh quang nhìn thấy có bước sóng dài hơn bước sóng chiếu xạ trong một khoảng thời gian rất ngắn. Huỳnh quang có tính đặc hiệu và thường yếu hơn ánh sáng kích thích. Để quan sát huỳnh quang cụ thể, cần thêm bộ lọc chặn (hoặc triệt tiêu) phía sau thấu kính vật kính.
Chức năng của nó gồm có hai phần: thứ nhất, hấp thụ và chặn ánh sáng kích thích đi vào thị kính để tránh làm nhiễu huỳnh quang và làm hỏng mắt; thứ hai, để chọn và cho phép huỳnh quang cụ thể đi qua, thể hiện màu huỳnh quang cụ thể. Hai loại bộ lọc phải được sử dụng kết hợp.
