Phương pháp ghép ảnh kính hiển vi huỳnh quang

Jan 18, 2023

Để lại lời nhắn

Phương pháp ghép ảnh kính hiển vi huỳnh quang

 

Chúng ta thường thấy trong các bài viết ảnh huỳnh quang sẽ được hiển thị dưới dạng ghép lại như hình bên dưới. Hợp nhất có thể được sử dụng để phân biệt liệu hai (hoặc nhiều) tín hiệu huỳnh quang tại cùng một vị trí trong mô hoặc tế bào chồng lên nhau. Hôm nay chúng ta sẽ nói về cách ghép ảnh bằng kính hiển vi huỳnh quang~


1. Nguyên tắc cơ bản


Nguyên tắc cơ bản là tính toán lại dữ liệu màu của các pixel ở cùng một vị trí trên hai (hoặc nhiều) trang tính có kích thước bằng nhau theo một công thức để thu được màu mới. Ví dụ, màu đỏ và xanh lục của ảnh huỳnh quang chồng lên nhau tạo thành màu vàng. Thuật toán này dựa trên "chế độ bổ sung" RGB (như trong hình bên dưới), gần giống như "màu màn hình" trong chế độ hợp nhất lớp của Photoshop.


2. Giới thiệu phần mềm


Hôm nay mình sẽ giới thiệu một phần mềm thường dùng trong nghiên cứu khoa học: ImageJ. Sử dụng nó để ghép ảnh đơn giản và trực tiếp hơn so với sử dụng PS (đừng lo lắng về các lớp, chế độ lớp). ImageJ không cần cài đặt và phần mềm thậm chí có thể được mở và sử dụng trong ổ flash USB. Để thuận tiện cho bạn


Nói chung có hai phương pháp để hợp nhất ảnh huỳnh quang. Một là sử dụng phần mềm phù hợp với kính hiển vi để hợp nhất, hai là lưu ảnh huỳnh quang tương ứng với các đèn kích thích khác nhau trong cùng một trường nhìn. Khi hiển thị kết quả, hãy sử dụng phần mềm xử lý ảnh thông thường ( Ví dụ: PS) để hợp nhất. Nếu bạn lo lắng về sự tắt dần của huỳnh quang khi nhìn vào kính hiển vi huỳnh quang (đặc biệt là khi nhuộm bằng thuốc nhuộm huỳnh quang), bạn có thể chụp nhanh một loạt ảnh, sau đó chọn những ảnh đẹp để hợp nhất khi bạn quay lại màn hình hiển thị. kết quả. Tại thời điểm này, phương pháp thứ hai có thể linh hoạt và bình tĩnh hơn.

 

1 digital microscope -

Gửi yêu cầu