Phương pháp và các bước xử lý mẫu bằng kính hiển vi điện tử
Trước khi sử dụng kính hiển vi điện tử truyền qua để quan sát các mẫu sinh học, mẫu phải được xử lý trước. Các nhà khoa học sử dụng các phương pháp xử lý khác nhau tùy theo yêu cầu nghiên cứu khác nhau.
Cố định: Để bảo quản mẫu vật càng nhiều càng tốt, glutaraldehyde được sử dụng để làm cứng mẫu vật và axit osmic được sử dụng để nhuộm chất béo.
Cố định lạnh: Mẫu được đông lạnh nhanh chóng trong ethane lỏng để nước không kết tinh mà thay vào đó tạo thành băng vô định hình. Các mẫu được bảo quản theo cách này ít bị hư hỏng hơn nhưng độ tương phản của hình ảnh rất thấp.
Khử nước: Sử dụng ethanol và axeton để thay thế nước.
Đệm: Mẫu có thể được chia sau khi được đệm.
Phân đoạn: Mẫu được cắt thành lát mỏng bằng lưỡi kim cương.
Nhuộm màu: Các nguyên tử nặng như chì hoặc uranium phân tán electron mạnh hơn các nguyên tử nhẹ hơn và do đó có thể được sử dụng để tăng độ tương phản.
Trước khi sử dụng kính hiển vi điện tử truyền qua để quan sát kim loại, mẫu phải được
Virus dưới kính hiển vi điện tử
Cắt thành những lát rất mỏng (khoảng 0,1 mm) rồi sử dụng phương pháp đánh bóng điện phân để tiếp tục làm mỏng kim loại thường tạo thành một lỗ ở giữa mẫu nơi các electron có thể đi qua kim loại rất mỏng ở đó. Các kim loại không thể đánh bóng bằng phương pháp điện phân hoặc các vật liệu không dẫn điện hoặc có độ dẫn điện kém, chẳng hạn như silicon, thường được làm mỏng bằng phương pháp cơ học và sau đó được xử lý bằng phương pháp tấn công ion. Để ngăn chặn các mẫu không dẫn điện tích tụ tĩnh điện trong kính hiển vi điện tử quét, bề mặt của chúng phải được phủ một lớp dẫn điện.
Tại sao kính hiển vi điện tử có độ phân giải cao hơn?
Đúng như tên gọi, cái gọi là kính hiển vi điện tử là kính hiển vi sử dụng chùm tia điện tử làm nguồn chiếu sáng. Vì chùm tia điện tử có thể bị uốn cong dưới tác dụng của từ trường hoặc điện trường ngoài, tạo thành hiện tượng khúc xạ tương tự như hiện tượng ánh sáng khả kiến truyền qua thủy tinh nên chúng ta có thể sử dụng hiệu ứng vật lý này để tạo ra một “thấu kính” cho chùm tia điện tử, từ đó phát triển kính hiển vi điện tử Đặc điểm của kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) là chúng ta sử dụng chùm tia điện tử xuyên qua mẫu để tạo ảnh, khác với kính hiển vi điện tử quét (Scanning Electron Microscope, SEM). Vì bước sóng của sóng điện tử nhỏ hơn nhiều so với bước sóng của ánh sáng khả kiến (bước sóng của sóng điện tử 1{2}}0kV là 0,0037nm, trong khi bước sóng của ánh sáng tím là 400nm), theo công thức quang học, về mặt lý thuyết, chúng ta có thể kỳ vọng rằng khả năng phân giải của kính hiển vi điện tử sẽ tốt hơn nhiều so với kính hiển vi quang học. Trên thực tế, khả năng phân giải của kính hiển vi điện tử hiện đại đã đạt tới 0,1nm. Sách giáo khoa vật lý tự chọn cho học sinh phổ thông giải thích chi tiết hơn (thông tin nhỏ đằng sau hiệu ứng quang điện)
