Phương pháp chuẩn bị mẫu cho kính hiển vi quang học và điện tử của màng
Phương pháp vi phim thường bao gồm bốn loại: phương pháp cắt, phương pháp niêm phong tổng thể, phương pháp phủ và phương pháp ép.
①Phương pháp cắt lát. Độ dày lát cắt của kính hiển vi quang học từ 2 đến 25 micron, vật liệu động vật và thực vật nói chung, lát cắt dày khoảng 10 micron là phù hợp. Phương pháp phân chia khác nhau tùy theo các tác nhân nhúng khác nhau. Thường được sử dụng là phương pháp cắt parafin, phương pháp cắt keo bông, phương pháp cắt đông lạnh và phương pháp glycol methacrylate (gọi tắt là phương pháp GMA). Phương pháp cắt parafin bao gồm các bước cố định, nhúng, cắt, nhuộm màu, khử nước và hàn kín. Điều quan trọng là nhúng vật liệu sinh học vào sáp parafin và sử dụng sáp parafin làm chất hỗ trợ để cắt vật liệu sinh học ngâm trong khối sáp thành những lát mỏng lý tưởng. Quy trình vận hành như sau: cố định → rửa nước → từng bước từ khử nước rượu nồng độ thấp đến cao → độ trong của xylene → ngâm sáp → nhúng → cắt → vá → tẩy sáp xylene → từng bước từ nồng độ cao đến thấp xử lý cồn, và cuối cùng chuyển sang nước → nhuộm → từng bước từ khử nước nồng độ thấp đến cao → độ trong của xylene → bịt kín bằng keo nhựa. Các bước cơ bản liên quan đều giống nhau trong tất cả các loại kỹ thuật làm phim.
② Phương pháp niêm phong tích hợp. Được sử dụng cho các tế bào đơn lẻ, các sinh vật cực nhỏ hoặc các cơ quan phân tán của phương pháp dán màng toàn bộ. Phương pháp này cũng yêu cầu nhiều bước cố định, nhuộm màu, khử nước, trong suốt và bịt kín. Phương pháp này được sử dụng để chế tạo phần miệng của cánh ren và côn trùng.
Phương pháp bôi nhọ. Phương pháp chuẩn bị trong đó mẫu sinh học dễ phân tán được phủ lên một phiến kính. Vết máu là một ví dụ.
④Phương pháp ép. Các mô tự nhiên, dễ phân tán hoặc các mô dễ phân tán sau khi điều trị, chẳng hạn như tế bào sinh tinh động vật, tế bào đầu rễ, v.v. trên slide, cộng với một lớp phủ, sau đó nghiền nát mạnh các mô, để các tế bào hoặc cấu trúc nội bào lan rộng thành một lớp về phương pháp quay phim. Phương pháp ép thường được sử dụng để quan sát nhiễm sắc thể, thường được nhuộm bằng màu đỏ tươi axetat, đỏ địa y và đỏ axit carbolic.
