Phương pháp làm tiêu bản kính hiển vi
Có ba phương pháp làm tiêu bản kính hiển vi:
1. Phương pháp bôi
Phương pháp phết là phương pháp chuẩn bị trong đó vật liệu được trải đều trên slide.
Vật liệu phết bao gồm sinh vật đơn bào, tảo nhỏ, máu, nuôi cấy vi khuẩn, mô rời của thực vật và động vật, tổ tinh trùng, bao phấn, v.v.
Cần chú ý khi bôi:
(1) Tấm trượt phải sạch sẽ.
(2) Thanh trượt phải được giữ phẳng.
3) Lớp phủ phải đồng nhất. Nhỏ một giọt chất lỏng phủ vào bên phải tâm của slide và dàn đều bằng lưỡi dao mổ hoặc tăm, v.v.
4) Lớp phủ phải mỏng. Sử dụng một slide khác làm dụng cụ đẩy, đẩy nhẹ từ phải sang trái dọc theo bề mặt của slide bằng một giọt dung dịch bôi (góc giữa hai slide phải là 30 độ đến 45 độ) và thoa một lớp mỏng đồng đều.
5) Cố định. Nếu cần cố định, hãy sử dụng chất cố định hóa học hoặc phương pháp cố định hút ẩm (vi khuẩn).
6) Nhuộm. Sử dụng xanh methylene cho vi khuẩn và vết Rachel cho máu. Dung dịch nhuộm phải bao phủ toàn bộ bề mặt phủ.
7) Rửa sạch. Hấp thụ trên giấy thấm hoặc nướng khô.
8) Dán phim. Để bảo quản lâu dài, hãy sử dụng màng cây Canada.
2. Phương pháp ép phim
Phương pháp màng áp lực là vật liệu sinh học được đặt giữa tấm trượt và tấm phủ, tác dụng một áp suất nhất định, các tế bào mô sẽ được ép ra ngoài theo phương pháp chuẩn bị.
(1) lấy vật liệu. Quan sát sự phân chia, phân chia tế bào nên chọn những tế bào tươi tốt, tươi tốt làm nguyên liệu. Chẳng hạn như đầu rễ, mô phân sinh đầu thân, tế bào tủy xương, bao phấn (tế bào mẹ phấn hoa). Tổ tinh trùng (spermatogonia) và vân vân.
(2) Cố định. Việc cố định vật liệu có thể được xác định theo nhu cầu, ngay sau khi quan sát màng áp suất vật liệu, không thể thực hiện xử lý cố định riêng biệt (và nhuộm màu đồng bộ); lấy vật liệu không ngay sau khi kiểm tra, vật liệu có thể được cố định bằng chất cố định (thường bằng chất cố định rượu axetat). Cố định 2 ~ 24 giờ (tùy chất liệu) sau khi rửa bằng ethanol 95%, bảo quản trong ethanol 70%, ở chế độ chờ.
(3) Sự phân ly. Các tế bào không dễ phân tán vật liệu bằng dung dịch tách thủy phân (như HCl 1N hoặc axit clohydric, dung dịch cồn), xử lý chung 6 ~ 20 phút, sau khi phân ly và rửa sạch bằng nước trước khi nhuộm.
(4) Nhuộm màu. Có rất nhiều loại vết bẩn. Quan sát nhiễm sắc thể thường được sử dụng để nhuộm bằng dung dịch nhuộm axetat màu đỏ tươi.
(5) Ép phim. Đặt vật liệu lên một phiến kính, thêm một giọt nước hoặc dung dịch nhuộm màu, đậy nắp lá kính và dùng ngón tay cái ấn nhẹ vào phiến kính.
(6) Quan sát. Sau khi ép phim, nó có thể được quan sát dưới kính hiển vi.
