Phương pháp tạo ảnh trường sáng và trường tối-trong kính hiển vi huỳnh quang
(1) Phương pháp chụp ảnh trường sáng (BFI), chỉ cho phép chùm tia điện tử truyền qua ở vùng đồng trục đi qua khẩu độ vật kính, tạo thành ảnh tối trên nền sáng. Khẩu độ của khẩu độ vật kính càng nhỏ thì độ tương phản của hình ảnh trường sáng càng lớn; (2) Hình ảnh trường tối (DFI) là một kỹ thuật chỉ cho phép một phần chùm tia tán xạ góc lớn hoặc một chùm nhiễu xạ nhất định của tinh thể đi qua khẩu độ vật kính, đồng thời chặn chùm tia truyền qua. Điều này tạo thành một hình ảnh đồ họa sáng trên nền tối. Phương pháp chụp ảnh trường tối này có thể cải thiện độ tương phản của hình ảnh và là một kỹ thuật chụp ảnh quan trọng.
Có khoảng bốn phương pháp để thu được hình ảnh trường tối bằng kính hiển vi huỳnh quang Leica: (1) duy trì độ chiếu sáng thẳng đứng dọc theo trục quang trong khi di chuyển khẩu độ vật kính; (2) Việc sử dụng phương pháp chiếu sáng xiên để thu các chùm tia phân tán theo hướng của trục quang được gọi là Chụp ảnh trường tối trung tâm (CDFI); (3) Khẩu độ vật kính có điểm chặn chùm tia ở giữa và vùng trong suốt hình tròn; (4) Sử dụng thấu kính hội tụ hình tròn trong suốt để cảm nhận ánh sáng và khẩu độ tròn trung tâm cho vật kính. Phương pháp * ở đây là đơn giản nhất nhưng nó sử dụng hình ảnh điện tử ở vùng ống tay xa nên quang sai lớn và chất lượng hình ảnh không tốt lắm. Phương pháp thứ hai có thể tránh được nhược điểm trên nhưng khẩu độ vật kính của kính hiển vi huỳnh quang Leica chỉ tiếp nhận một phần nhỏ electron nhiễu xạ tán xạ nên hiệu suất thấp hơn. Phía khẩu độ thường phải chịu một lượng lớn electron bắn phá, dễ gây ra hiện tượng nhiễm bẩn không đối xứng và ảnh hưởng đến chất lượng hình ảnh. Vật kính hình khuyên đã được cải tiến về mặt này, nhưng nhược điểm là khó sản xuất và khó đạt được sự đối xứng trục hoàn toàn. Với các yêu cầu tương đối thoải mái đối với hệ thống chiếu sáng, giải pháp thứ hai có thể được áp dụng, bao gồm việc bổ sung khẩu độ hình khuyên ở thiết bị ngưng tụ để cung cấp ánh sáng chùm tia rỗng cho mẫu. Tác dụng của thiết bị này. Độ phân giải hình ảnh của nó có thể gần bằng hình ảnh trường sáng, trong khi độ tương phản được cải thiện đáng kể.
