Ứng dụng và sử dụng nguyên lý kính hiển vi huỳnh quang
Nguyên lý và đặc điểm cấu tạo của kính hiển vi huỳnh quang: Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng nguồn sáng điểm có hiệu suất phát sáng cao để phát ra ánh sáng có bước sóng nhất định (như tia cực tím 3650 in hoặc ánh sáng xanh tím 4200 in) thông qua hệ thống lọc màu làm ánh sáng kích thích để kích thích huỳnh quang trong mẫu vật. Sau khi chất này phát ra huỳnh quang với nhiều màu sắc khác nhau, nó sẽ được quan sát thông qua độ phóng đại của vật kính và thị kính. Bằng cách này, dưới nền tương phản mạnh, ngay cả khi huỳnh quang rất yếu, nó vẫn dễ dàng được xác định và có độ nhạy cao. Nó chủ yếu được sử dụng để nghiên cứu cấu trúc và chức năng của tế bào cũng như thành phần hóa học. Cấu trúc cơ bản của kính hiển vi huỳnh quang bao gồm kính hiển vi quang học thông thường cộng với một số phụ kiện (như nguồn sáng huỳnh quang, bộ lọc kích thích, bộ tách chùm hai màu, bộ lọc chặn, v.v.). Nguồn sáng huỳnh quang - thường sử dụng đèn thủy ngân siêu cao áp (50 đến 200W), có thể phát ra ánh sáng có bước sóng khác nhau, nhưng mỗi chất huỳnh quang có bước sóng kích thích tạo ra huỳnh quang mạnh nhất, do đó, bộ lọc kích thích (Nói chung có bộ lọc kích thích tia cực tím, tím, xanh lam và xanh lục), chỉ cho phép ánh sáng kích thích có bước sóng nhất định đi qua và chiếu sáng mẫu vật, đồng thời hấp thụ tất cả các ánh sáng khác. Sau khi mỗi chất được chiếu xạ bằng ánh sáng kích thích sẽ phát ra huỳnh quang nhìn thấy có bước sóng dài hơn bước sóng chiếu xạ trong thời gian rất ngắn. Huỳnh quang có tính đặc hiệu và thường yếu hơn ánh sáng kích thích. Để quan sát huỳnh quang cụ thể, cần có bộ lọc chặn (hoặc triệt tiêu) phía sau thấu kính vật kính. Nó có hai chức năng: một là hấp thụ và chặn ánh sáng kích thích đi vào thị kính để tránh làm nhiễu huỳnh quang và làm hỏng mắt; cách còn lại là chọn và cho phép huỳnh quang cụ thể đi qua để hiển thị màu huỳnh quang cụ thể. Hai bộ lọc phải được chọn và sử dụng cùng nhau.
