Ưu điểm và nhược điểm của kính hiển vi quét laser đa điểm ảnh
Kính hiển vi quét laser đa điểm là một phương pháp thí nghiệm dựa trên công nghệ kính hiển vi quét laser, cung cấp khả năng phân chia quang học chính xác hơn trong quan sát ba chiều. Phương pháp kích thích huỳnh quang đa photon sử dụng ánh sáng đỏ có bước sóng dài hoặc ánh sáng cận hồng ngoại để thu thập hình ảnh huỳnh quang có độ phân giải cao của mẫu vật, ít gây tổn hại cho mẫu vật sống, vì vậy nó phù hợp để chụp ảnh tế bào sống, đặc biệt là đối với các mô sống dày như lát não, phôi, nghiên cứu hình ảnh của toàn bộ cơ quan hoặc thậm chí toàn bộ sinh vật.
Những ưu điểm như sau:
1. Bị kích thích bởi ánh sáng đỏ hoặc ánh sáng hồng ngoại, độ tán xạ ánh sáng nhỏ (độ tán xạ của các hạt nhỏ tỷ lệ nghịch với lũy thừa bậc 4 của bước sóng).
2. Không cần lỗ kim và có thể thu thập nhiều photon tán xạ hơn từ phần hình ảnh.
3. Lỗ kim không thể phân biệt được các photon tán xạ phát ra từ vùng ngoài tiêu cự hay vùng lấy nét và tỷ lệ tín hiệu trên tạp âm của hình ảnh đa photon ở các lớp sâu là tốt.
4. Ánh sáng cực tím hoặc ánh sáng khả kiến được sử dụng để kích thích một photon dễ dàng bị mẫu hấp thụ và suy giảm trước khi chùm tia chạm tới mặt phẳng tiêu cự và không dễ kích thích các lớp sâu.
5. Về phương diện quan sát bằng kính hiển vi sinh học, việc cân nhắc đầu tiên là không làm tổn hại đến trạng thái hoạt động của bản thân sinh vật và duy trì sự tuần hoàn của nước, nồng độ ion, oxy và chất dinh dưỡng. Trong trường hợp quan sát bằng ánh sáng, cả năng lượng nhiệt và photon phải nằm trong lượng bức xạ và năng lượng ánh sáng sẽ không làm hỏng tế bào.
6. Kính hiển vi đa điểm cũng có nhiều ưu điểm. Chẳng hạn như độ phân giải ba chiều, độ xuyên sâu, hiệu quả tán xạ, ánh sáng nền, tỷ lệ nhiễu tín hiệu, khả năng kiểm soát, v.v., có những đặc điểm vượt trội mà kính hiển vi laser trước đây không có hoặc không thể so sánh được.
Kính hiển vi quét laser đồng tiêu đa điểm ảnh đã được mở rộng sang các lĩnh vực nghiên cứu và ứng dụng khác nhau. Nó có thể thực hiện quan sát ba chiều không phá hủy các mẫu ở trạng thái tự nhiên và có thể cải thiện độ phân giải cũng như tỷ lệ tín hiệu trên tạp âm của hệ thống. Sử dụng vật liệu kích thích đa photon Nó cũng có thể nhận ra lưu trữ dữ liệu chiều cao ba chiều và chế tạo vi mô hướng tùy ý ba chiều, có giá trị ứng dụng cao. Người ta tin rằng với sự phát triển hơn nữa của máy móc, vật liệu và công nghệ laser liên quan đến kính hiển vi đồng tiêu đa photon, sẽ có nhiều kính hiển vi quét laser đồng tiêu Photon sẽ phát triển hơn và ứng dụng rộng rãi hơn.
Những nhược điểm như sau:
1. Chỉ dành cho chụp ảnh huỳnh quang.
2. Nếu mẫu bao gồm các nhóm mang màu có thể hấp thụ ánh sáng kích thích, chẳng hạn như sắc tố, thì mẫu có thể bị hỏng do nhiệt.
3. Độ phân giải giảm đi một chút. Mặc dù có thể cải thiện bằng cách sử dụng đồng thời khẩu độ đồng tiêu nhưng tín hiệu sẽ bị mất.
4. Do hạn chế của tia laser cực nhanh đắt tiền, giá thành của kính hiển vi quét đa điểm tương đối cao.
