Phương pháp chuẩn bị tiêu bản kính hiển vi
1. Phương pháp bôi
Phương pháp bôi màu là phương pháp chuẩn bị các phiến kính bằng cách phủ đều các vật liệu lên chúng.
Vật liệu phết tế bào bao gồm các sinh vật đơn bào, tảo nhỏ, máu, môi trường nuôi cấy vi khuẩn, mô rời của động vật và thực vật, tinh hoàn, bao phấn, v.v.
Khi bôi cần chú ý:
(1) Tấm kính phải được làm sạch.
(2) Tấm kính phải phẳng.
(3) Lớp phủ phải đồng nhất. Nhỏ giọt vào giữa bên phải của phiến kính và trải đều bằng lưỡi mổ hoặc tăm.
(4) Lớp phủ phải mỏng. Sử dụng một phiến kính khác làm phiến kính, đẩy nhẹ từ phải sang trái dọc theo bề mặt của phiến kính với chất lỏng được bôi (góc giữa hai phiến kính phải là 30 độ đến 45 độ) và bôi một lớp mỏng đồng đều.
(5) Đã sửa. Nếu cần cố định, có thể sử dụng chất cố định hóa học hoặc phương pháp làm khô (vi khuẩn) để cố định.
(6) Nhuộm màu. Vi khuẩn sử dụng xanh methylen và máu sử dụng dung dịch nhuộm Wright. Dung dịch nhuộm phải bao phủ toàn bộ bề mặt lớp phủ.
(7) Rửa sạch. Dùng giấy thấm để thấm hoặc làm khô.
(8) Dán phim lại. Bảo quản lâu dài bằng màng cây Canada.
2. Phương pháp ép viên
Phương pháp nén là phương pháp cắt các vật liệu sinh học bằng cách đặt chúng giữa một phiến kính và một nắp, tạo một áp lực nhất định để phân tán các tế bào mô.
Quy trình chung của phương pháp ép viên:
(1) Lựa chọn vật liệu. Để quan sát sự phân chia tế bào, nên chọn các tế bào mô tươi có khả năng phân chia tế bào mạnh mẽ làm nguyên liệu. Chẳng hạn như đầu rễ, mô phân sinh đầu thân, tế bào tủy xương, bao phấn (tế bào mẹ phấn hoa). Tổ tinh trùng (tế bào sinh tinh), v.v.
(2) Đã sửa. Việc cố định vật liệu có thể được xác định theo nhu cầu, và mẫu phải được nén và quan sát ngay lập tức. Không cần thiết phải thực hiện xử lý cố định riêng biệt (đồng bộ với nhuộm); Nếu vật liệu không được kiểm tra ngay sau khi lấy mẫu thì có thể cố định bằng chất cố định (thường là chất cố định bằng cồn axit axetic). Sau khi cố định từ 2-24 giờ (tùy theo nguyên liệu), rửa sạch bằng etanol 95% và bảo quản trong etanol 70% để sử dụng sau.
(3) Sự tách biệt. Những vật liệu khó phân tán bởi tế bào nên được xử lý bằng dung dịch tách thủy phân (như HCl 1N hoặc tinh dịch axit clohydric) trong 6-20 phút. Sau khi phân ly, chúng phải được rửa sạch bằng nước trước khi nhuộm.
(4) Nhuộm màu. Có nhiều loại thuốc nhuộm. Nhiễm sắc thể thường được nhuộm bằng dung dịch nhuộm màu đỏ tươi axit axetic.
(5) Nhấn vào máy tính bảng. Đặt vật liệu lên một phiến kính, thêm một giọt nước hoặc dung dịch thuốc nhuộm, đậy nắp bằng nắp và ấn nhẹ bằng ngón tay cái.
(6) Quan sát. Sau khi nén, nó có thể được quan sát dưới kính hiển vi.
