Thông số kỹ thuật mẫu nào là cần thiết cho kính hiển vi ánh sáng?
Trong quy trình chuẩn bị mẫu của kính hiển vi quang học, độ dày lát cắt của mẫu nằm trong khoảng 2-25um; độ dày lát cắt của kính hiển vi điện tử nằm trong 50-100nm (ngoại trừ kính hiển vi điện tử điện áp cao, độ dày mẫu có thể đạt tới 1um), vì vậy phương pháp lát cắt được sử dụng không giống nhau.
Về chất mang, chất mang của tiết diện kính hiển vi quang học là phiến kính, còn chất mang của tiết diện kính hiển vi điện tử là dạng lưới.
Về mặt cố định, các lát cắt của kính hiển vi quang học được cố định bằng chất cố định hỗn hợp, trong khi các lát cắt của kính hiển vi điện tử được cố định nhiều lần bằng một chất cố định duy nhất.
Về phương pháp nhuộm màu, việc nhuộm các mẫu quang học tương đối đơn giản. Theo các mẫu quan sát khác nhau và các loại kính hiển vi quang học, nó thường đủ để nhuộm với một số chất nhuộm cố định. Có nhiều phương pháp phức tạp để nhuộm lại các mẫu kính hiển vi điện tử, chẳng hạn như nhuộm âm bản, nhuộm bạc, v.v.
Về mặt nhúng, parafin, collodion, gelatin, v.v. được sử dụng làm chất nhúng cho các phần kính hiển vi quang học; nhựa epoxy, nhựa polystyrene, nhựa isobutylene và nhựa tan trong nước được sử dụng làm chất nhúng cho phần kính hiển vi điện tử.
Để đảm bảo rằng trường nhìn của kính hiển vi có thể được chiếu sáng đồng đều và đầy đủ, hệ thống quang học chiếu sáng phải được điều chỉnh khi kính hiển vi được lắp đặt và gỡ lỗi lần đầu tiên. Đây là một phương tiện quan trọng và là cách cơ bản nhất để sử dụng kính hiển vi một cách chính xác và thu được kết quả chính xác và đáng tin cậy. yêu cầu. Ngoài ra, nắm vững chính xác việc điều chỉnh hệ thống đường dẫn quang học chiếu sáng là một bước cần thiết sau khi thay thế bóng đèn nguồn sáng trong quá trình sử dụng kính hiển vi và đây cũng là phương tiện cần thiết để thỉnh thoảng kiểm tra hoạt động của kính hiển vi trong ngày. sử dụng. Việc điều chỉnh hệ thống đường dẫn quang chiếu sáng của kính hiển vi chủ yếu bao gồm bốn mục sau: 1. Điều chỉnh sơ bộ buồng đèn nguồn sáng bên ngoài kính hiển vi ① Mở vỏ buồng đèn trước, nhấn kẹp lò xo để đưa bóng đèn halogen vào trong. ổ cắm và tránh dùng ngón tay tiếp xúc trực tiếp với bóng đèn trong quá trình lắp đặt (có thể dùng khăn mềm hoặc giấy ngăn cách) để tránh Dấu vân tay và bụi bẩn khác bám trên bóng đèn, sẽ ảnh hưởng đến tuổi thọ của bóng đèn. ②Đặt hộp đèn lên bàn, sau khi bật nguồn, dùng tuốc nơ vít chuyên dụng điều chỉnh lỗ núm lấy nét của đèn (được đánh dấu bằng "←→"), sao cho dây tóc chiếu lên tường 1-2 m đi, và hình ảnh dây tóc được điều chỉnh. Sau đó điều chỉnh độ cao của đèn và điều chỉnh lỗ ren (được đánh dấu bằng "──") để vị trí của dây tóc phù hợp; sau đó điều chỉnh vị trí bên trái và bên phải của đèn để điều chỉnh lỗ vít (được đánh dấu bằng "──") để làm cho vị trí bên trái và bên phải của dây tóc phù hợp.
2. Mục đích của việc kiểm tra và điều chỉnh vị trí của nguồn sáng (dây tóc) trong kính hiển vi là để điều chỉnh đầu ảnh của nguồn sáng vuông góc với trường nhìn của vật kính và để đảm bảo rằng trường nhìn của kính hiển vi được chiếu sáng đầy đủ và đồng nhất từ góc nhìn của nguồn sáng. Chiếu sáng, là điều kiện tiên quyết để điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kuhler. Dụng cụ cơ bản cần có: Kính thiên văn định tâm được trang bị khi mua kính hiển vi. ① Rút ống bọc kính mờ trong hộp đèn và đặt hộp đèn trở lại kính hiển vi. ② Chọn vật kính 10 ×, bật chương trình nguồn sáng để tìm mẫu và lấy nét rõ, sau đó sử dụng vật kính 40 × để lấy nét rõ mẫu (ống kính vật kính 40 × Bạn có thể thấy toàn bộ hình ảnh của dây tóc ); ③ Mở màng khẩu độ và màng trường của tụ điện đến mức tối đa; ④ Rút phích cắm của một trong các thị kính, thay thế bằng kính thiên văn định tâm, nắm lấy phần màu trắng, dùng tay kia kéo căng thị kính màu đen, Bạn có thể nhìn thấy hình ảnh dây tóc trong tầm nhìn; ⑤ Nếu vị trí của dây tóc không phù hợp, hãy điều chỉnh lỗ "──" để điều chỉnh hình ảnh dây tóc theo hướng nằm ngang và điều chỉnh lỗ "──" để điều chỉnh hình ảnh dây tóc theo hướng thẳng đứng cho đến khi Điều chỉnh hình ảnh dây tóc đến ảnh tròn sáng vừa lấp đầy khẩu độ của vật kính; ⑥ Sau khi điều chỉnh, lắp ống bọc kính mờ trở lại vị trí ban đầu, rút phích cắm của kính thiên văn định tâm và lắp lại thị kính cho lần điều chỉnh tiếp theo. Việc điều chỉnh buồng đèn nguồn chiếu sáng bên ngoài kính hiển vi và xác minh vị trí của vật thể phát sáng nguồn sáng bên trong kính hiển vi chỉ cần được thực hiện khi kính hiển vi được lắp đặt và gỡ lỗi lần đầu và khi bóng đèn được thay thế và kính hiển vi không thể được điều chỉnh ngẫu nhiên khi sử dụng kính hiển vi. Trường hợp nhầm lẫn có thể điều chỉnh lại về trạng thái ban đầu theo các bước trên.
3. Điều chỉnh chính xác hệ thống chiếu sáng Kohler Một trong những nhiệm vụ chính của việc điều chỉnh chính xác kính hiển vi là điều chỉnh hệ thống đường dẫn quang học chiếu sáng, và điều quan trọng là điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kohler. Đối với mỗi người sử dụng kính hiển vi, đặc biệt là những người làm công việc chụp ảnh hiển vi, họ cần phải có một sự hiểu biết nhất định và nắm vững nguyên lý của hệ thống chiếu sáng Kuhler và các bước điều chỉnh của nó để phát huy hết các chức năng của kính hiển vi và chụp ảnh. Những bức ảnh xuất hiện có thể có hiệu ứng nhất quán và hoàn hảo hơn. Nguyên lý của hệ thống chiếu sáng Kohler đơn giản là: ánh sáng phát ra từ bất kỳ điểm nào trên nguồn sáng của nguồn sáng có thể chiếu sáng trường nhìn của kính hiển vi và ánh sáng phát ra từ mỗi điểm trên nguồn sáng được thu thập và trong trường tầm nhìn của kính hiển vi Đạt được độ sáng rất đầy đủ và đồng đều. Mục đích của việc điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kuhler là để có được độ sáng đồng đều và đủ cho trường quan sát được quan sát, đồng thời ngăn ánh sáng đi lạc ảnh hưởng hoặc can thiệp vào hệ thống hình ảnh, để tránh tạo sương mù trên phim trong khi chụp ảnh. Các thành phần cần thiết cho hệ thống chiếu sáng Kohler có khả năng điều chỉnh cao: màng chắn trường, hệ thống thấu kính tụ có thể điều chỉnh trên trục. ① Chọn vật kính 10× và thị kính 10× ② Đặt thấu kính phía trước của tụ quang vào đường quang học, điều chỉnh màng khẩu độ ở vị trí vừa phải (không quá to hoặc nhỏ), sau đó nâng tụ quang lên vị trí vị trí trên cùng, và điều chỉnh bàn xoay tụ quang đến vị trí "J" của Trường sáng ③ Điều chỉnh màng trường ở mức tối thiểu (0,1)
④ Đặt mẫu sinh học đã niêm phong lên sân khấu, bật nguồn sáng và lấy nét rõ
⑤ Sẽ có một vùng được chiếu sáng một phần hoặc điểm sáng trong trường nhìn, đó là hình ảnh mờ của màng trường, trong đó có thể nhìn thấy rõ các chi tiết của mẫu; bên ngoài nó là trường nhìn tối hơn, có thể không nhất thiết Xem rõ chi tiết của mẫu
⑥Điều chỉnh tụ quang xuống dưới một chút, sao cho điểm sáng trong trường nhìn dần dần thu nhỏ lại, dần dần trở thành hình ảnh đa giác rõ ràng, đó là hình ảnh rõ nét của màng trường;
⑦Nói chung, hình ảnh đa giác không nằm ở trung tâm của trường nhìn và cần điều chỉnh một cặp vít định tâm của bộ ngưng tụ để điều chỉnh hình ảnh đa giác của màng trường đến vị trí trung tâm;
⑧Mở dần màng chắn của trường nhìn để biến hình ảnh đa giác thành đa giác nội tiếp của trường nhìn và kiểm tra thêm trạng thái căn chỉnh. Nếu căn chỉnh không lý tưởng, hãy tiếp tục tinh chỉnh vít căn chỉnh;
⑨Mở nhẹ màng chắn của trường nhìn để hình ảnh đa giác của nó biến mất trên mép của trường nhìn. Cho đến nay, việc điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kohler đã hoàn tất. Sau khi hệ thống chiếu sáng Kohler được điều chỉnh, toàn bộ trường quan sát được chiếu sáng đồng đều và vi ảnh được chụp sáng và rõ ràng với độ tương phản bình thường.
