Sự khác biệt giữa kính hiển vi tương phản pha và kính hiển vi thông thường là gì?
Kính hiển vi tương phản pha là một kính hiển vi đặc biệt, chuyển đổi chênh lệch đường quang (tức là chênh lệch pha) được tạo ra khi ánh sáng đi qua các chi tiết của các mẫu trong suốt thành chênh lệch cường độ ánh sáng.
Khi ánh sáng đi qua một mẫu vật tương đối trong suốt, không có thay đổi đáng kể về bước sóng (màu) và biên độ (độ sáng) của ánh sáng. Do đó, khi quan sát các mẫu vật không bị trói buộc (như tế bào sống) dưới kính hiển vi quang học thông thường, hình thái và cấu trúc bên trong của chúng thường khó phân biệt. Tuy nhiên, do các chỉ số khúc xạ và độ dày khác nhau của các bộ phận khác nhau của tế bào, sẽ có sự khác biệt về chiều dài đường quang giữa ánh sáng trực tiếp và nhiễu xạ khi ánh sáng đi qua mẫu vật này. Khi chiều dài đường quang tăng hoặc giảm, pha của sóng ánh sáng tăng tốc hoặc độ trễ sẽ thay đổi (dẫn đến sự khác biệt pha). Sự khác biệt pha của ánh sáng là không thể chấp nhận được đối với mắt thường, nhưng kính hiển vi độ tương phản pha có thể sử dụng thiết bị đặc biệt của nó - khẩu độ tròn và tấm pha - để chuyển đổi độ khác biệt của ánh sáng thành một sự khác biệt về độ sáng). Quan sát các tế bào sống và một số cấu trúc tinh tế bên trong các tế bào không thể nhìn thấy hoặc quan sát rõ ràng dưới kính hiển vi quang học thông thường và kính hiển vi trường tối.
Nguyên tắc hình ảnh của kính hiển vi tương phản pha: Trong quá trình kiểm tra, nguồn sáng chỉ có thể đi qua một vòng trong suốt với khẩu độ tròn và sau khi đi qua một bình ngưng, nó được ngưng tụ vào một chùm ánh sáng. Khi chùm ánh sáng này đi qua vật thể được kiểm tra, nó trải qua các mức độ khác nhau của độ lệch (nhiễu xạ) do các đường quang khác nhau của mỗi phần. Do thực tế là hình ảnh được hình thành bởi vòng trong suốt trùng với mặt phẳng liên hợp trên tấm pha và mặt phẳng tiêu cự phía sau ống kính khách quan. Do đó, ánh sáng thẳng mà không có độ lệch đi qua bề mặt liên hợp, trong khi ánh sáng nhiễu xạ với độ lệch đi qua bề mặt bù. Do các tính chất khác nhau của bề mặt liên hợp và bề mặt bù trên tấm pha, chúng sẽ tương ứng tạo ra sự khác biệt pha nhất định và giảm cường độ của ánh sáng đi qua hai phần này. Hai bộ ánh sáng sau đó sẽ hội tụ qua ống kính phía sau và di chuyển trên cùng một đường quang, gây nhiễu giữa ánh sáng trực tiếp và ánh sáng nhiễu xạ, biến sự khác biệt pha thành chênh lệch biên độ. Theo cách này, trong kính hiển vi tương phản pha, sự khác biệt pha không thể phân biệt được bằng mắt người được chuyển thành sự khác biệt biên độ (chênh lệch độ sáng) có thể được phân biệt bằng mắt người qua ánh sáng của cơ thể trong suốt không màu.
