Ba loại quan sát bằng kính hiển vi
I. BF trường sáng (BF trường sáng)
BF trường sáng là một phương pháp kính hiển vi quen thuộc, được sử dụng rộng rãi trong bệnh lý học và xét nghiệm để quan sát các phần được nhuộm màu và tất cả các kính hiển vi đều có khả năng thực hiện chức năng này.
Vùng sáng
II. Trường tối DF (Trường tối DF)
DF trường tối thực chất là chiếu sáng trường tối. Nó khác với trường sáng ở chỗ nó không quan sát trực tiếp ánh sáng được chiếu sáng mà là ánh sáng phản xạ hoặc nhiễu xạ từ vật thể đang được kiểm tra. Kết quả là trường nhìn trở thành nền tối, trong khi đối tượng được kiểm tra xuất hiện dưới dạng hình ảnh sáng.
Nguyên lý trường nhìn tối dựa trên hiện tượng Tyndall trong quang học, bụi trong trường hợp ánh sáng mạnh xuyên qua ánh sáng trực tiếp, mắt người không thể quan sát được, điều này là do ánh sáng mạnh xung quanh gây ra. Nếu ánh sáng chiếu xiên vào nó, các hạt dường như tăng kích thước do sự phản xạ ánh sáng và mắt người có thể nhìn thấy được.
Một phụ kiện đặc biệt cần thiết để quan sát trường tối là kính ngắm phát hiện trường tối. Nó có đặc điểm là không cho chùm sáng đi qua vật thể được kiểm tra từ dưới lên trên mà bằng cách thay đổi đường đi của ánh sáng sao cho hướng xiên về phía vật thể được kiểm tra, sao cho ánh sáng chiếu vào không đi thẳng vào vật thể được kiểm tra. vật kính và hình ảnh sáng được hình thành bằng cách sử dụng ánh sáng phản xạ hoặc nhiễu xạ từ bề mặt của vật thể được kiểm tra. Độ phân giải của quan sát trường tối cao hơn nhiều so với quan sát trường sáng, * lên tới 0.02-0.004
Cánh đồng tối tăm
III. Độ tương phản pha PH
Trong sự phát triển của kính hiển vi quang học, việc phát minh thành công PH tương phản pha là một thành tựu quan trọng trong công nghệ kính hiển vi hiện đại. Như chúng ta đã biết, mắt người chỉ có thể phân biệt được bước sóng (màu sắc) và biên độ (độ sáng) của sóng ánh sáng, đối với mẫu vật sinh học không màu và sáng thì khi ánh sáng đi qua, bước sóng và biên độ không thay đổi nhiều nên rất khó để quan sát mẫu vật trong quan sát trường sáng.
Kính hiển vi tương phản pha sử dụng sự khác biệt trong phạm vi ánh sáng của vật thể được kiểm tra để kiểm tra bằng kính hiển vi, nghĩa là nó sử dụng hiệu quả hiện tượng giao thoa ánh sáng để thay đổi độ lệch pha không thể phân biệt được của mắt người thành chênh lệch biên độ có thể phân biệt được, thậm chí không màu và trong suốt chất có thể trở nên rõ ràng. Điều này tạo điều kiện thuận lợi rất nhiều cho việc quan sát các tế bào sống, vì vậy kính hiển vi tương phản pha được sử dụng rộng rãi trong kính hiển vi đảo ngược.
Nguyên lý cơ bản của kính hiển vi tương phản pha là sự khác biệt trong phạm vi quang học của ánh sáng khả kiến truyền qua mẫu vật được chuyển thành sự khác biệt về biên độ, do đó làm tăng độ tương phản giữa các cấu trúc khác nhau và làm cho chúng có thể nhìn thấy được. Ánh sáng bị khúc xạ qua mẫu vật và lệch khỏi đường đi ban đầu, đồng thời bị trễ 1/4λ (bước sóng). Nếu 1/4λ tăng hoặc giảm trở lại, chênh lệch phạm vi quang học sẽ trở thành 1/2λ và sự giao thoa giữa hai chùm quang hợp được tăng cường sau khi trục của hai chùm tia bị giao thoa và biên độ tăng hoặc giảm, do đó cải thiện độ tương phản Về cấu tạo, kính hiển vi tương phản pha có hai đặc điểm đặc biệt khác với kính hiển vi quang học thông thường:
1. Màng ngăn hình khuyên (annulardiaphragm) nằm giữa nguồn sáng và tụ điện, có vai trò làm cho ánh sáng đi qua tụ quang tạo thành một hình nón rỗng chứa ánh sáng, tập trung vào mẫu vật.
2. tấm pha (hình khuyênphaseplate) trong vật kính được phủ tấm pha magie florua, ánh sáng trực tiếp hoặc nhiễu xạ có thể bị trễ pha 1/4λ. Có hai loại:
1.Một tấm pha: ánh sáng trực tiếp bị trễ 1/4 λ, hai nhóm sóng ánh sáng cộng hưởng sóng ánh sáng đồng trục, biên độ tăng, cấu trúc mẫu vật sáng hơn môi trường xung quanh, hình thành độ tương phản sáng (hoặc độ tương phản âm) .
2. Tấm pha B: ánh sáng nhiễu xạ bị trễ 1/4 λ, hai nhóm sóng ánh sáng sau khi hợp nhất trục sóng ánh sáng giảm đi, biên độ trở nên nhỏ hơn, hình thành độ tương phản tối (hoặc độ tương phản dương ), cấu trúc tối hơn môi trường xung quanh.
