Cấu trúc đặc biệt của kính hiển vi huỳnh quang bao gồm:
(I) Hệ thống lọc màu
Bộ lọc màu là một bộ phận quan trọng của kính hiển vi huỳnh quang, các thành phần cốt lõi của nó là bộ lọc ánh sáng kích thích (bộ lọc rào cản thứ nhất), bộ lọc ánh sáng phát xạ (bộ lọc rào cản thứ hai) và thành phần nửa trong suốt và nửa chống lọc (gương tách chùm tia). . Nhiều nhà sản xuất mô hình bộ lọc màu khác nhau, tên thường không thống nhất.
1. Bộ lọc ánh sáng kích thích và bộ lọc ánh sáng phát xạ: theo nguồn sáng và đặc tính của fluorochrome, thường chọn ba loại kết hợp sau, để cung cấp một phạm vi bước sóng nhất định của ánh sáng kích thích và tạo ra sự kích thích mẫu huỳnh quang thông qua thị kính để tạo ảnh.
Kích thích tia cực tím: Bộ lọc ánh sáng kích thích cho phép truyền tia UV và chặn sự truyền qua của ánh sáng khả kiến trên 400nm. Bộ lọc phát xạ tương ứng cho phép ánh sáng xanh đi qua, xuất hiện màu xanh lam trong trường nhìn, ví dụ như nhuộm DAPI.
Kích thích ánh sáng xanh: Bộ lọc ánh sáng kích thích cho phép ánh sáng xanh đi qua, chặn các bước sóng ánh sáng khác. Bộ lọc phát xạ tương ứng cho phép ánh sáng xanh đi qua, ví dụ như đối với các điểm đánh dấu nhuộm GFP.
Kích thích màu xanh lá cây: Bộ lọc kích thích cho phép ánh sáng xanh đi qua, chặn các bước sóng khác. Bộ lọc phát xạ tương ứng thường cho phép ánh sáng đỏ đi qua, ví dụ như nhuộm Rhodamine.
2. Bộ lọc nửa trong suốt và nửa phản chiếu: vai trò của nó là ngăn chặn hoàn toàn sự kích thích ánh sáng qua sự phản xạ; và thông qua phạm vi bước sóng tương ứng của ánh sáng phát ra. Mô hình của nó và sự kích thích của bộ lọc ánh sáng và sự phát xạ của bộ lọc ánh sáng tương ứng với.
(B) vật kính và thị kính
Có thể áp dụng nhiều loại vật kính khác nhau, nhưng * lựa chọn tốt vật kính tiêu sắc, đối xứng, vì khả năng tự phát huỳnh quang của nó rất nhỏ và đặc tính truyền ánh sáng (dải bước sóng) phù hợp cho huỳnh quang. Vì độ sáng huỳnh quang của hình ảnh trong trường quan sát của kính hiển vi tỷ lệ với bình phương tốc độ mõm của vật kính và tỷ lệ nghịch với độ phóng đại của nó, do đó, để cải thiện độ sáng của hình ảnh huỳnh quang, vật kính có tỷ lệ mõm lớn phải được dùng. Đặc biệt đối với mẫu vật có huỳnh quang không đủ mạnh, nên sử dụng khẩu độ lớn, vật kính truyền ánh sáng cao, với thị kính càng thấp càng tốt.
(C) các thiết bị quang học khác
Tấm phản xạ, lớp phản chiếu của nó thường được mạ nhôm, bởi vì nhôm hấp thụ vùng cực tím và ánh sáng nhìn thấy của vùng xanh tím ít hơn, phản chiếu tới 90% hoặc hơn (trong khi độ phản xạ của bạc chỉ là 70%). Phản xạ phẳng thường được sử dụng. Gương tiêu điểm, được thiết kế và sản xuất đặc biệt cho kính hiển vi huỳnh quang Gương tiêu điểm làm bằng thủy tinh thạch anh hoặc thủy tinh trong suốt tia cực tím khác. Thiết bị ánh sáng rơi, ngoài chức năng của nguồn sáng truyền qua, còn phù hợp hơn với các mẫu vật mờ đục và mờ, chẳng hạn như màng dày, màng lọc, khuẩn lạc, nuôi cấy mô và các mẫu khác để quan sát trực tiếp. Trong những năm gần đây, sự phát triển của một loại kính hiển vi huỳnh quang mới sử dụng thiết bị ánh sáng rơi, gọi là kính hiển vi huỳnh quang rơi.
(D) nguồn sáng
Ngày nay, đèn thủy ngân cao áp 50 hoặc 100W được sử dụng làm nguồn sáng. Hoạt động do phóng điện hai điện cực, do bay hơi thủy ngân, bóng áp suất không khí tăng nhanh (quá trình này thường mất khoảng 5 ~ 15 phút) và trong quá trình phát xạ lượng tử ánh sáng, bước sóng của ánh sáng giải phóng đủ để kích thích do đó, tất cả các loại chất huỳnh quang đều được sử dụng phổ biến cho kính hiển vi huỳnh quang.
Đèn thủy ngân có tuổi thọ tương đối ngắn, thường là 200 giờ và để đáp ứng giới hạn tuổi thọ này, trong những năm gần đây, nguồn sáng huỳnh quang mới, X-Cite, đã được sử dụng rộng rãi nhờ tuổi thọ bóng đèn dài 2000 giờ và khả năng sử dụng linh hoạt. - không cần làm nóng trước và có thể sử dụng ngay khi lấy ra khỏi hộp.
