Sự khác biệt giữa kính hiển vi đồng tiêu laser và kính hiển vi quang học truyền thống
Kính hiển vi huỳnh quang đồng tiêu quét laser là một công cụ phân tích sinh học tế bào và phân tử tương đối tiên tiến sử dụng máy tính, laser và công nghệ xử lý hình ảnh để thu được dữ liệu ba chiều của các mẫu sinh học. Nó chủ yếu được sử dụng để quan sát cấu trúc của các tế bào sống và sự thay đổi sinh học của các phân tử và ion cụ thể, phân tích định lượng và xác định định lượng theo thời gian thực.
Nguyên lý của kính hiển vi đồng tiêu laser: sử dụng lỗ kim chiếu sáng đặt phía sau nguồn sáng và lỗ kim phát hiện đặt phía trước máy dò để nhận ra điểm chiếu sáng và phát hiện điểm. Ánh sáng phát ra từ nguồn sáng thông qua lỗ kim chiếu sáng được hội tụ vào một điểm trên mặt phẳng tiêu cự của mẫu và huỳnh quang phát ra từ điểm này được tạo ảnh trên lỗ kim phát hiện và bất kỳ ánh sáng phát ra nào bên ngoài điểm này đều bị chặn bởi phát hiện lỗ kim. Lỗ kim chiếu sáng và lỗ kim phát hiện được liên hợp với điểm được chiếu xạ hoặc điểm được phát hiện, vì vậy điểm được phát hiện là điểm tiêu điểm và mặt phẳng chứa điểm được phát hiện là mặt phẳng tiêu điểm.
Máy tính hiển thị các điểm được phát hiện trên màn hình máy tính dưới dạng các điểm hình ảnh. Để tạo ra một hình ảnh hoàn chỉnh, hệ thống quét trong đường dẫn quang quét trên mặt phẳng tiêu cự của mẫu để tạo ra một hình ảnh đồng tiêu hoàn chỉnh. Miễn là bàn soi di chuyển lên và xuống dọc theo trục Z, một lớp mẫu mới sẽ được di chuyển đến mặt phẳng tiêu điểm và lớp mẫu mới được tạo ảnh trên màn hình. Với chuyển động liên tục của trục Z, có thể thu được hình ảnh liên tục của các lớp khác nhau của mẫu. Hình ảnh cắt nhẹ.
Sự khác biệt giữa kính hiển vi ánh sáng truyền thống
Kính hiển vi huỳnh quang truyền thống có một thiếu sót không thể khắc phục: các cấu trúc huỳnh quang bên ngoài mặt phẳng tiêu cự bị mờ và mờ. Lý do là hầu hết các mẫu vật sinh học đều có cấu trúc chồng lên nhau. Nếu các cấu trúc được đánh dấu huỳnh quang được phân bố ở các mức độ khác nhau và chồng lên nhau, thì huỳnh quang phân tán từ bên trên hoặc bên dưới mặt phẳng tiêu điểm cũng được thấu kính vật kính tiếp nhận và độ phân giải của kính hiển vi huỳnh quang sẽ được cải thiện đáng kể. giảm bớt.
Trên cơ sở kính hiển vi quang học truyền thống, kính hiển vi đồng tiêu quét laser sử dụng ánh sáng laser làm nguồn sáng, áp dụng nguyên lý và thiết bị lấy nét liên hợp và sử dụng máy tính để thực hiện xử lý, quan sát, phân tích và xuất hình ảnh kỹ thuật số của các đối tượng được quan sát. Mẫu có thể được chụp cắt lớp và chụp ảnh để quan sát và phân tích không phá hủy cấu trúc không gian ba chiều của tế bào. Đồng thời, sử dụng đầu dò đánh dấu miễn dịch huỳnh quang và đánh dấu huỳnh quang ion, công nghệ này không chỉ có thể quan sát các tế bào và phần mô cố định mà còn thực hiện quan sát động thời gian thực và phát hiện cấu trúc, phân tử, ion và hoạt động sống của tế bào sống, ở cấp độ dưới tế bào Quan sát các tín hiệu sinh lý như Ca2 cộng , giá trị pH, điện thế màng và những thay đổi về hình thái tế bào, đã trở thành một thế hệ công cụ nghiên cứu mạnh mẽ mới trong các lĩnh vực hình thái học, sinh học tế bào phân tử, khoa học thần kinh, dược học và di truyền học.
