Cách sử dụng cơ bản của kính hiển vi trường tối như sau
1. Lắp đặt tụ quang trường tối (hoặc dùng giấy đen dày làm tấm chắn sáng và đặt dưới tụ quang của kính hiển vi thông thường để thu được hiệu ứng trường tối).
2. Chọn nguồn sáng mạnh, thường là đèn soi kính hiển vi để tránh ánh sáng chiếu trực tiếp vào vật kính.
3. Thêm một giọt dầu tuyết tùng vào giữa bình ngưng tụ và lam kính để tránh phản xạ toàn phần ánh sáng chiếu vào bình ngưng, không chiếu tới vật cần kiểm tra và trường tối.
4. Thực hiện điều chỉnh trung tâm, nghĩa là di chuyển tụ quang theo chiều ngang sao cho trục quang học của tụ quang và trục quang học của kính hiển vi nằm trên một đường thẳng. Nâng và hạ tụ quang, căn chỉnh tiêu điểm của tụ quang (đỉnh của chùm tia hình nón trong Hình 1-2) với đối tượng cần kiểm tra.
5. Chọn vật kính tương ứng với tụ quang, điều chỉnh độ dài tiêu cự và hoạt động theo phương pháp của kính hiển vi thông thường.
