Ưu và nhược điểm của kính hiển vi quét laser đa photon
Kính hiển vi quét laser đa photon là phương pháp thử nghiệm dựa trên công nghệ kính hiển vi quét laser, cung cấp nhiều **khả năng phân cắt quang học hơn trong quan sát 3D. Phương pháp kích thích huỳnh quang đa photon sử dụng bước sóng dài của ánh sáng đỏ hoặc cận hồng ngoại để thu được hình ảnh huỳnh quang có độ phân giải cao của mẫu vật với khả năng tiêu diệt tối thiểu các mẫu vật hoạt động, phù hợp để chụp ảnh các tế bào sống, đặc biệt là các mô sống dày như lát não, phôi, toàn bộ cơ quan và thậm chí toàn bộ sinh vật.
Ưu điểm như sau:
1, việc sử dụng ánh sáng đỏ hoặc kích thích ánh sáng hồng ngoại, tán xạ ánh sáng nhỏ(sự phân tán củabé nhỏcác hạt và bước sóng của lũy thừa bậc 4 của tỷ lệ nghịch đảo).
2, không cần lỗ kim, có thể thu thập nhiều photon tán xạ hơn từ mặt cắt hình ảnh.
3, lỗ kim không thể phân biệt giữa các photon tán xạ phát ra từ vùng mất nét hoặc vùng tiêu cự, nhiều photon trong tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu hình ảnh sâu là tốt.
4, sự kích thích đơn photon của tia cực tím hoặc ánh sáng nhìn thấy được sử dụng trong chùm tia để chạm tới mặt phẳng tiêu điểm trước khi mẫu dễ bị hấp thụ và suy giảm, không dễ bị kích thích sâu.
5, trong quan sát bằng kính hiển vi sinh học, * điều cần cân nhắc đầu tiên là không làm tổn hại đến trạng thái hoạt động của chính sinh vật, để duy trì sự lưu thông nước, nồng độ ion, oxy và chất dinh dưỡng. Trong các trường hợp quan sát ánh sáng, cả năng lượng nhiệt và năng lượng photon phải tồn tại trong tế bào mà không làm ảnh hưởng đến lượng bức xạ, năng lượng ánh sáng.
6, kính hiển vi đa photon cũng có nhiều ưu điểm. Chẳng hạn như độ phân giải ba chiều, độ sâu xâm nhập, hiệu suất tán xạ, ánh sáng nền, tỷ lệ tín hiệu trên tạp âm, điều khiển, v.v., có những kính hiển vi laser trước đây không có hoặc có những đặc điểm không thể so sánh được.
Kính hiển vi quét laser đồng tiêu đa photon đã được mở rộng sang nhiều lĩnh vực nghiên cứu và ứng dụng khác nhau. Nó có khả năng quan sát không phá hủy ba chiều các mẫu ở trạng thái tự nhiên và có thể cải thiện độ phân giải cũng như tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu của hệ thống. Bằng cách sử dụng sự thay đổi tính chất vật liệu sau khi kích thích nhiều photon, cũng có thể đạt được khả năng lưu trữ dữ liệu chiều cao ba chiều và chế tạo vi mô ba chiều theo bất kỳ hướng nào, có giá trị ứng dụng cao. Có thể tin rằng với sự phát triển hơn nữa của máy móc, vật liệu, công nghệ laser và các công nghệ khác liên quan đến kính hiển vi đồng tiêu đa photon, kính hiển vi quét laser đồng tiêu đa photon sẽ có sự phát triển lớn hơn và ứng dụng rộng rãi hơn.
Nhược điểm như sau:
1, chỉ có hình ảnh huỳnh quang.
2, nếu mẫu bao gồm các tế bào mang màu có thể hấp thụ ánh sáng kích thích, chẳng hạn nhưsắc tố, mẫucó thể bị hư hỏng do nhiệt.
3, độ phân giải giảm nhẹ, mặc dùnó có thể được cải thiện bằng cách sử dụng đồng thời khẩu độ đồng tiêu, Nhưngsẽ bị mất tín hiệu.
4. Giá thành của kính hiển vi quét đa photon cao do hạn chế của các tia laser cực nhanh đắt tiền.
