Sử dụng đúng cách Kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược
Kính hiển vi huỳnh quang soi ngược là loại kính hiển vi đa chức năng dùng trong lĩnh vực nghiên cứu khoa học sinh học cao cấp. Cấu trúc của nó rất phức tạp và đắt tiền. Vì vậy, để sinh viên cao học y khoa nắm bắt đúng cách vận hành và sử dụng kính hiển vi huỳnh quang soi ngược, trước tiên giảng viên phải trình diễn thao tác thực tế của kính hiển vi huỳnh quang soi ngược. Trước đây, một khóa học đã được thiết lập để tìm hiểu kiến thức cơ bản về kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược, giới thiệu cấu trúc, nguyên lý, chức năng và phương pháp sử dụng cơ bản của kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược, sau đó trong thao tác cụ thể, đối với các mẫu vật khác nhau, thể hiện các chức năng khác nhau, từ nông đến sâu, dần dần Để tiêu chuẩn hóa việc sử dụng kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược của các nghiên cứu sinh y khoa.
1. Sử dụng đúng phương pháp quan sát trường sáng. Một trong những chức năng của kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược là quan sát trường sáng. Nguyên tắc cơ bản là sau khi mẫu vật được chiếu xạ bởi ánh sáng, sự hấp thụ ánh sáng của từng bộ phận sẽ khác nhau để nhận ra hình ảnh trong nền sáng. Nó chủ yếu thích hợp cho các tế bào nhuộm màu hoặc nhuộm màu, Quan sát các mẫu vật như các phần mô.
2. Sử dụng đúng phương pháp quan sát tương phản pha. Chức năng thứ hai của kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược là quan sát tương phản pha. Nguyên tắc cơ bản của nó là chuyển đổi chênh lệch đường quang của các phần khác nhau của mẫu thành chênh lệch biên độ. Việc quan sát được thực hiện thông qua một vật kính tương phản pha với một tấm pha và một thấu kính hội tụ có màng chắn vòng. Nó chủ yếu được áp dụng để quan sát các tế bào sống hoặc các phần mô không nhuộm màu, trong quá trình giảng dạy thực nghiệm, ngoài việc hướng dẫn chính xác các sinh viên tốt nghiệp y khoa quan sát các phương pháp vận hành cơ bản của quan sát tương phản pha, điều quan trọng hơn là hướng dẫn họ hiểu và nắm vững các tiêu bản dùng để quan sát tương phản pha. Đối với họ, quan sát bằng kính hiển vi các tế bào nuôi cấy được sử dụng phổ biến nhất trong nghiên cứu khoa học trong tương lai. Trước hết, để lựa chọn thiết bị tế bào, thông thường nên sử dụng đĩa nuôi cấy bằng thủy tinh và nhựa, đĩa nuôi cấy và chai nuôi cấy. Hầu hết chúng đều không màu và trong suốt, có thể quan sát trực tiếp trên kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược mà không cần đổ dịch tế bào và các phương pháp xử lý khác. Thứ hai, trong quá trình quan sát bằng kính hiển vi, không được tùy ý mở nắp thiết bị, để không làm nhiễm bẩn tế bào. Cuối cùng, đối với người vận hành, họ cần đeo găng tay, khẩu trang và áo khoác trắng, điều này không chỉ có thể bảo vệ sức khỏe của chính họ mà còn ngăn ngừa ô nhiễm tế bào.
3. Sử dụng đúng phương pháp quan sát huỳnh quang. Chức năng thứ ba của kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược là quan sát huỳnh quang. Nguyên tắc cơ bản là sử dụng ánh sáng kích thích để kích thích mẫu để tạo ra huỳnh quang, để nhận ra sự quan sát về hình dạng và vị trí của mẫu. Nó chủ yếu phù hợp để quan sát các mẫu có nhãn huỳnh quang. Quan sát huỳnh quang là một chức năng quan trọng của kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược và các phụ kiện của nó đắt tiền và sử dụng đặc biệt. Để sinh viên tốt nghiệp y khoa nắm bắt chính xác cách vận hành và sử dụng quan sát huỳnh quang, giáo viên không chỉ dạy họ các phương pháp vận hành cơ bản mà quan trọng hơn là dạy họ nắm vững đặc thù của nó. Trước hết, trong quá trình chuẩn bị mẫu vật, kính trượt và kính che phải có bề mặt nhẵn và độ dày thích hợp (kính trượt phải nằm trong khoảng 0.8 mm đến 1.2 mm và kính che phải khoảng { {5}}.17mm); mẫu thử phải có độ dày thích hợp và tránh các tế bào Chồng chéo hoặc che lấp bởi các tạp chất; môi trường gắn nên sử dụng hỗn hợp thể tích bằng nhau của đệm glycerol và đệm cacbonat (0.5mol/L pH9.0-9.5). Thứ hai, trước khi quan sát huỳnh quang nên tắt đèn điện trong phòng và đèn trắng của kính hiển vi huỳnh quang soi ngược để đảm bảo môi trường trong phòng tối. Cuối cùng, trong quá trình quan sát huỳnh quang, thời gian quan sát cần được kiểm soát chặt chẽ, thường là 1-2 giờ/lần là phù hợp, nếu không huỳnh quang sẽ suy giảm và biến mất; khi điều chỉnh nguồn sáng nên đeo kính bảo vệ để tránh tác hại của tia cực tím đối với kính.
4. Sử dụng đúng chức năng chụp ảnh. Trong nghiên cứu khoa học, không chỉ yêu cầu kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược có thể thực hiện các quan sát khác nhau mà còn yêu cầu kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược có thể thực hiện chụp ảnh. Hệ thống kính hiển vi huỳnh quang đảo ngược kết hợp kính hiển vi quang học với máy tính thông qua chuyển đổi quang điện, không chỉ để quan sát bằng kính hiển vi trên thị kính mà còn để quan sát, chỉnh sửa và lưu hình ảnh động theo thời gian thực trên máy tính.
