Nguyên tắc và các đặc điểm cấu trúc của kính hiển vi huỳnh quang
Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng nguồn ánh sáng điểm hiệu quả cao để phát ra một bước sóng ánh sáng nhất định (như tia cực tím 3650 hoặc ánh sáng xanh tím 4200) thông qua hệ thống lọc màu như ánh sáng kích thích, kích thích các chất huỳnh quang trong mẫu vật để phát ra nhiều màu sắc khác nhau của huỳnh quang, và sau đó quan sát qua độ phóng đại của ống kính. Theo cách này, ngay cả với huỳnh quang yếu trong một nền tảng mạnh mẽ, nó rất dễ nhận ra và có độ nhạy cao. Nó chủ yếu được sử dụng để nghiên cứu cấu trúc tế bào, chức năng và thành phần hóa học. Cấu trúc cơ bản của kính hiển vi huỳnh quang bao gồm kính hiển vi quang học thông thường và một số phụ kiện như nguồn ánh sáng huỳnh quang, bộ lọc kích thích, bộ tách chùm màu kép và bộ lọc chặn. Nguồn ánh sáng huỳnh quang - thường sử dụng đèn thủy ngân áp suất cực cao (50-200 W), có thể phát ra ánh sáng của các bước sóng khác nhau, nhưng mỗi chất huỳnh quang có bước sóng ánh sáng kích thích tạo ra huỳnh quang mạnh. Do đó, các bộ lọc kích thích (thường phải thêm các bộ lọc kích thích cực tím, tím, xanh dương và màu xanh lá cây) để chỉ cho phép một bước sóng kích thích nhất định đi qua và chiếu xạ mẫu vật, trong khi hấp thụ tất cả các ánh sáng khác. Sau khi được chiếu xạ với ánh sáng kích thích, mỗi chất phát ra huỳnh quang có thể nhìn thấy với bước sóng dài hơn bước sóng chiếu xạ trong một khoảng thời gian rất ngắn. Huỳnh quang có độ đặc hiệu và thường yếu hơn ánh sáng kích thích. Để quan sát huỳnh quang cụ thể, bộ lọc chặn (hoặc triệt tiêu) cần được thêm vào phía sau ống kính khách quan. Các chức năng của nó có hai mặt: đầu tiên, để hấp thụ và chặn ánh sáng kích thích đi vào thị kính để tránh làm phiền huỳnh quang và làm hỏng mắt; Thứ hai, để chọn và cho phép huỳnh quang cụ thể đi qua, thể hiện một màu huỳnh quang cụ thể. Hai loại bộ lọc phải được sử dụng kết hợp.
