Phương pháp đếm trực tiếp bằng kính hiển vi vi sinh
Sử dụng một hemocytometer để đếm trực tiếp các vi sinh vật dưới kính hiển vi là một phương pháp thường được sử dụng để đếm vi sinh vật. Ưu điểm của phương pháp này là tính trực quan và tốc độ của nó. Đặt huyền phù vi khuẩn được pha loãng thích hợp (hoặc huyền phù bào tử) trong buồng đếm giữa slide hemocytometer và nắp trượt, và đếm dưới kính hiển vi. Do khối lượng không đổi của phòng đếm (0. 1mm2), tổng số vi sinh vật trên một đơn vị thể tích có thể được chuyển đổi dựa trên số lượng vi sinh vật được quan sát dưới kính hiển vi. Do thực tế là phương pháp này tính toán tổng các tế bào vi khuẩn sống và chết, nó còn được gọi là phương pháp đếm toàn bộ vi khuẩn.
Một tấm đếm tế bào máu thường là một slide thủy tinh được thiết kế đặc biệt với bốn rãnh tạo thành ba nền tảng. Nền tảng giữa được chia làm một nửa cho một rãnh ngang ngắn và mỗi bên của nền tảng được khắc bằng một lưới. Mỗi lưới được chia thành chín hình vuông lớn và hình vuông lớn ở giữa là phòng đếm, nơi việc đếm vi sinh vật được thực hiện.
Nhìn chung có hai thông số kỹ thuật cho quy mô của phòng đếm. Một là một hình vuông lớn được chia thành 16 hình vuông giữa và mỗi hình vuông giữa được chia thành 25 hình vuông nhỏ (Hình VIII -2); Một phương pháp khác là chia một hình vuông lớn thành 25 hình vuông giữa và mỗi hình vuông giữa được chia thành 16 hình vuông nhỏ (Hình VIII -1, c). Nhưng bất kể kích thước của bảng đếm, số lượng hình vuông nhỏ trong mỗi hình vuông lớn là như nhau, nghĩa là, 16 × 25=400 hình vuông nhỏ,
Nếu chiều dài bên của mỗi hình vuông lớn là 1mm, diện tích của mỗi hình vuông lớn là 1mm2. Sau khi phủ bằng kính nắp, chiều cao giữa slide và kính nắp là 0. 1mm, do đó, thể tích của phòng đếm là 0. 1mm3.
Khi đếm, tổng số vi khuẩn trong năm ô vuông thường được tính, và sau đó giá trị trung bình của mỗi hình vuông. Nhân lên 16 hoặc 25 cho tổng số vi khuẩn trong một hình vuông lớn, sau đó được chuyển đổi thành tổng số vi khuẩn trong 1ml dung dịch vi khuẩn.
