Những cải tiến trong kính hiển vi đa điểm quét laser
Kính hiển vi đa dạng quét laser là một sự cải thiện đáng kể của kính hiển vi quang học, chủ yếu biểu hiện trong khả năng quan sát các cấu trúc sâu của các tế bào sống, các tế bào cố định và mô và thu được cấu trúc ba mặt phẳng Z rõ ràng và rõ ràng, có thể được sử dụng để xây dựng cấu trúc ba chiều. Kính hiển vi đồng tiêu sử dụng nguồn ánh sáng laser, được mở rộng để lấp đầy toàn bộ mặt phẳng tiêu cự của ống kính khách quan, và sau đó hội tụ thành các điểm rất nhỏ trên mặt phẳng tiêu cự của mẫu vật qua hệ thống ống kính của ống kính khách quan. Theo khẩu độ số của ống kính mục tiêu, đường kính của điểm chiếu sáng là về 0. 25-0. 8 μ m, và độ sâu là khoảng 0. 5-1. Kích thước của điểm đồng tiêu được xác định bởi thiết kế kính hiển vi, bước sóng laser, đặc điểm khách quan, cài đặt trạng thái đơn vị quét và các thuộc tính mẫu. Phạm vi chiếu sáng và độ sâu của kính hiển vi trường lớn, trong khi sự chiếu sáng của kính hiển vi đồng tiêu được tập trung vào một tiêu điểm trên mặt phẳng tiêu cự. Ưu điểm cơ bản của kính hiển vi đồng tiêu là nó có thể thực hiện phân đoạn quang học tốt trên các mẫu huỳnh quang dày (tối đa 5 0 m trở lên), với độ dày khoảng 0,5 đến 1,5 m. Có thể thu được hình ảnh lát quang học loạt bằng cách di chuyển mẫu vật lên và xuống bằng động cơ bước trục z của kính hiển vi. Việc thu thập thông tin hình ảnh được điều khiển trong một mặt phẳng và sẽ không bị can thiệp bởi các tín hiệu phát ra từ các vị trí khác trên mẫu vật. Sau khi loại bỏ ảnh hưởng của huỳnh quang nền và tăng tỷ lệ nhiễu tín hiệu, sự tương phản và độ phân giải của hình ảnh đồng tiêu được cải thiện đáng kể so với hình ảnh huỳnh quang chiếu sáng trường truyền thống. Trong nhiều mẫu vật, các thành phần cấu trúc phức tạp đan xen để tạo thành các hệ thống phức tạp, nhưng một khi đủ các phần quang học có thể được thu thập, chúng ta có thể sử dụng phần mềm để xây dựng lại chúng theo ba chiều. Phương pháp thí nghiệm này đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học để làm sáng tỏ các mối quan hệ cấu trúc và chức năng phức tạp giữa các tế bào hoặc mô.
