Ưu điểm được cải thiện của kính hiển vi đa photon quét laser
Kính hiển vi đa điểm quét laser là một cải tiến quan trọng của kính hiển vi quang học, chủ yếu cho thấy nó có thể quan sát cấu trúc sâu của tế bào sống, tế bào và mô cố định, đồng thời có thể thu được cấu trúc mặt phẳng Z nhiều lớp rõ ràng và sắc nét, nghĩa là các lát cắt quang học , có thể được sử dụng để xây dựng cấu trúc rắn ba chiều của mẫu vật. Kính hiển vi đồng tiêu sử dụng nguồn sáng laser, lấp đầy toàn bộ mặt phẳng tiêu cự phía sau của vật kính sau khi mở rộng, sau đó đi qua hệ thống thấu kính của vật kính để hội tụ thành các điểm rất nhỏ trên mặt phẳng tiêu cự của mẫu vật. Theo khẩu độ số của vật kính, đường kính của điểm chiếu sáng sáng nhất là khoảng 0,25 ~ 0,8μm và độ sâu khoảng 0,5 ~ 1,5 μ m .. Kích thước của tiêu điểm copolyme hóa phụ thuộc vào thiết kế kính hiển vi, bước sóng laser, đặc điểm vật kính, cài đặt trạng thái đơn vị quét và đặc tính của mẫu vật. Phạm vi chiếu sáng và độ sâu của kính hiển vi trường rất lớn, trong khi độ chiếu sáng của kính hiển vi đồng tiêu tập trung vào một tiêu điểm ** trên mặt phẳng tiêu cự. Ưu điểm cơ bản nhất của kính hiển vi đồng tiêu là nó có thể tạo ra các lát quang học mịn của mẫu vật huỳnh quang dày (có thể đạt tới 50 μm trở lên) và độ dày của lát cắt khoảng 0,5 đến 1,5 μm. Một loạt các hình ảnh lát quang học có thể thu được bằng cách di chuyển mẫu lên xuống bằng động cơ bước trục Z của kính hiển vi. Việc thu thập thông tin hình ảnh được kiểm soát trong mặt phẳng đầu tiên và sẽ không bị nhiễu bởi tín hiệu từ các vị trí khác trên mẫu vật. Sau khi loại bỏ ảnh hưởng của huỳnh quang nền và tăng tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu, độ tương phản và độ phân giải của ảnh đồng tiêu rõ ràng được cải thiện so với ảnh huỳnh quang chiếu sáng trường truyền thống. Trong nhiều mẫu vật, nhiều thành phần cấu trúc phức tạp được đan xen vào nhau để tạo thành một hệ thống phức tạp, nhưng một khi có thể thu thập đủ các phần quang học, chúng ta có thể tái tạo lại chúng theo không gian ba chiều bằng phần mềm. Phương pháp thí nghiệm này đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học để làm rõ mối quan hệ cấu trúc và chức năng phức tạp giữa các tế bào hoặc mô.
