Kính hiển vi huỳnh quang khác với Kính hiển vi Laser đồng tiêu như thế nào
kính hiển vi huỳnh quang
1. Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng tia cực tím làm nguồn sáng để chiếu sáng vật thể đang được kiểm tra để phát ra huỳnh quang, sau đó quan sát hình dạng và vị trí của vật thể dưới kính hiển vi. Kính hiển vi huỳnh quang được sử dụng để nghiên cứu sự hấp thụ và vận chuyển các chất trong tế bào cũng như sự phân bố và định vị của các chất hóa học. Một số chất trong tế bào như diệp lục có thể phát huỳnh quang sau khi được chiếu tia cực tím; Bản thân một số chất không thể phát huỳnh quang, nhưng nếu chúng được nhuộm bằng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc kháng thể huỳnh quang, chúng có thể phát huỳnh quang sau khi chiếu tia cực tím. Kính hiển vi huỳnh quang là một trong những công cụ nghiên cứu định tính và định lượng về các chất đó.
2. Nguyên lý kính hiển vi huỳnh quang:
(A) Nguồn sáng: Nguồn sáng phát ra ánh sáng có bước sóng khác nhau (từ tia cực tím đến hồng ngoại).
(B) Nguồn sáng của bộ lọc kích thích: truyền ánh sáng có bước sóng cụ thể có thể làm cho mẫu vật phát huỳnh quang, đồng thời chặn ánh sáng không có tác dụng kích thích huỳnh quang.
(C) Mẫu vật huỳnh quang: Thường được nhuộm bằng chất màu huỳnh quang.
(D) Bộ lọc chặn: Chặn ánh sáng kích thích không được mẫu hấp thụ và truyền huỳnh quang có chọn lọc. Một số bước sóng trong huỳnh quang cũng được truyền đi có chọn lọc. Kính hiển vi sử dụng tia cực tím làm nguồn sáng để làm cho vật được chiếu sáng phát huỳnh quang. Kính hiển vi điện tử được Knorr và Hallowska lắp ráp lần đầu tiên vào năm 1931 tại Berlin, Đức. Kính hiển vi này sử dụng chùm tia điện tử tốc độ cao thay vì chùm ánh sáng. Do bước sóng của dòng điện tử ngắn hơn nhiều so với bước sóng của ánh sáng nên độ phóng đại của kính hiển vi điện tử có thể đạt tới 800,000 lần và giới hạn độ phân giải tối thiểu là 0,2 nanomet. Kính hiển vi điện tử quét, bắt đầu được sử dụng vào năm 1963, cho phép mọi người nhìn thấy các cấu trúc cực nhỏ trên bề mặt vật thể.
3. Phạm vi ứng dụng: Dùng để phóng to hình ảnh các vật thể nhỏ. Thường được sử dụng trong quan sát sinh học, y học, các hạt cực nhỏ, v.v.
kính hiển vi đồng tiêu
1. Kính hiển vi đồng tiêu bổ sung một thấu kính bán phản xạ vào đường quang của ánh sáng phản xạ, làm khúc xạ ánh sáng phản xạ truyền qua thấu kính sang các hướng khác. Có một vách ngăn với một lỗ kim ở tiêu điểm của nó, và lỗ kim nằm ở tiêu điểm, phía sau vách ngăn, là một ống nhân quang. Có thể tưởng tượng rằng ánh sáng phản xạ trước và sau khi phát hiện tiêu điểm ánh sáng đi qua hệ thống tiêu điểm này và không thể tập trung vào lỗ nhỏ và sẽ bị chặn bởi vách ngăn. Vì vậy, những gì quang kế đo được là cường độ ánh sáng phản xạ tại tiêu điểm.
2. Nguyên tắc: Kính hiển vi quang học truyền thống sử dụng nguồn sáng trường, hình ảnh của từng điểm trên mẫu vật sẽ bị nhiễu xạ hoặc tán xạ ánh sáng từ các điểm lân cận; kính hiển vi đồng tiêu quét laser sử dụng chùm tia laser để tạo thành nguồn sáng điểm thông qua các lỗ kim chiếu sáng để chiếu sáng bên trong mẫu vật. Mỗi điểm của mặt phẳng tiêu cự được quét và điểm được chiếu sáng trên mẫu vật được chụp ảnh tại lỗ kim phát hiện, được nhận từng điểm hoặc từng đường bằng ống nhân quang (PMT) hoặc thiết bị ghép lạnh (cCCD) phía sau phát hiện lỗ kim, và nhanh chóng hình ảnh huỳnh quang xuất hiện trên màn hình máy tính. Lỗ kim chiếu sáng và lỗ kim phát hiện liên hợp với mặt phẳng tiêu cự của vật kính. Các điểm trên mặt phẳng tiêu cự được tập trung đồng thời vào lỗ kim chiếu sáng và lỗ kim phát xạ. Các điểm bên ngoài mặt phẳng tiêu cự sẽ không được chụp ảnh tại lỗ kim phát hiện. Điều này thu được Ảnh đồng tiêu là mặt cắt quang học của mẫu vật, khắc phục được nhược điểm ảnh mờ ở kính hiển vi thông thường.
3. Lĩnh vực ứng dụng: Y học, nghiên cứu khoa học động vật và thực vật, hóa sinh, vi khuẩn, sinh học tế bào, phôi học mô, khoa học thực phẩm, di truyền, dược lý, sinh lý học, quang học, bệnh lý, thực vật học, khoa học thần kinh, sinh học biển và khoa học vật liệu, khoa học điện tử , cơ khí, địa chất dầu khí, khoáng vật học.
