Kính hiển vi huỳnh quang có thể được chia thành hai loại theo nguyên tắc đường dẫn quang:
1. Kính hiển vi huỳnh quang truyền
Kính hiển vi huỳnh quang cũ hơn sử dụng đèn chiếu sáng để kích thích huỳnh quang bằng cách truyền nguồn ánh sáng kích thích qua vật liệu mẫu vật. Ưu điểm của nó là huỳnh quang mạnh ở độ phóng đại thấp, nhưng nhược điểm của nó là huỳnh quang của nó giảm khi tăng độ phóng đại. Vì vậy, nó chỉ phù hợp để quan sát các vật liệu mẫu vật lớn hơn.
2. Kính hiển vi huỳnh quang ánh sáng rơi
Ánh sáng kích thích rơi xuống từ ống kính mục tiêu lên bề mặt mẫu vật, sử dụng cùng một ống kính khách quan như thiết bị ngưng tụ chiếu sáng và ống kính khách quan để thu thập huỳnh quang.
Một bộ tách chùm màu kép (gương lưỡng sắc) cần được thêm vào đường dẫn quang, tạo thành góc 45 độ với trục quang. Đèn kích thích được phản chiếu vào ống kính khách quan và tập trung vào mẫu. Độ huỳnh quang được tạo ra bởi mẫu, cũng như ánh sáng kích thích phản xạ từ bề mặt của ống kính khách quan và kính che, đi vào ống kính khách quan cùng một lúc và quay trở lại bộ tách chùm màu kép để tách ánh sáng kích thích và huỳnh quang. Đèn kích thích còn lại sau đó bị chặn bởi sự hấp thụ của bộ lọc. Nếu các kết hợp khác nhau của các bộ lọc kích thích, các bộ phân tách chùm màu kép và các bộ lọc chặn được sử dụng, chúng có thể đáp ứng nhu cầu của các sản phẩm phản ứng huỳnh quang khác nhau.
Ưu điểm của kính hiển vi huỳnh quang này là sự chiếu sáng trường đồng đều, hình ảnh rõ ràng và huỳnh quang mạnh hơn với độ phóng đại lớn hơn.
3. Kính hiển vi tương phản pha
Kính hiển vi tương phản pha là một kính hiển vi có thể chuyển đổi chênh lệch pha (hoặc chênh lệch đường quang) được tạo ra khi ánh sáng đi qua một vật thể thành biên độ (cường độ ánh sáng) thay đổi. Chủ yếu được sử dụng để quan sát các tế bào sống, các phần mô không có hoặc các mẫu vật bị nhuộm màu thiếu độ tương phản.
Mắt người chỉ có thể phân biệt những thay đổi trong bước sóng (màu) và biên độ của ánh sáng nhìn thấy, nhưng không thể phân biệt các thay đổi trong pha. Hầu hết các mẫu vật sinh học đều có độ trong suốt cao và biên độ của sóng ánh sáng vẫn không thay đổi sau khi đi qua, chỉ thay đổi pha.
Kính hiển vi tương phản pha về cơ bản chuyển đổi chênh lệch đường quang của ánh sáng nhìn thấy qua mẫu vật thành chênh lệch biên độ, do đó cải thiện độ tương phản giữa các cấu trúc khác nhau và làm cho chúng rõ ràng và rõ ràng. Sau khi đi qua mẫu vật, ánh sáng trải qua khúc xạ, lệch khỏi đường quang ban đầu và bị trì hoãn bởi 1/4 (bước sóng). Nếu chênh lệch đường quang được tăng hoặc giảm thêm 1/4, chênh lệch đường quang trở thành 1/2 và sự can thiệp giữa hai chùm sáng tăng hoặc giảm sau khi trục được kết hợp, cải thiện độ tương phản.
