Đếm vi sinh trực tiếp bằng kính hiển vi
Đếm trực tiếp dưới kính hiển vi sử dụng tấm hematocrit là phương pháp đếm vi sinh vật thường được sử dụng. Ưu điểm của phương pháp này là trực quan và nhanh chóng. Huyền phù vi khuẩn được pha loãng thích hợp (hoặc huyền phù bào tử) được đặt vào buồng đếm giữa phiến kính và lá kính phủ của tấm hematocrit và được đếm dưới kính hiển vi. Vì thể tích của buồng đếm không đổi (0,1 mm2), nên số lượng vi sinh vật quan sát được dưới kính hiển vi có thể được chuyển đổi thành tổng số vi sinh vật trên một đơn vị thể tích. Phương pháp này còn được gọi là đếm tổng số vi khuẩn vì nó đếm tổng số sinh vật sống và chết.
Một tấm hematocrit, thường là một tấm trượt đặc biệt có ba bệ gồm bốn khe. Bệ ở giữa được chia thành hai nửa bằng một rãnh ngang ngắn, mỗi bên của bệ có khắc một ô vuông, mỗi ô vuông được chia thành tổng cộng 9 ô vuông lớn, ở giữa ô vuông lớn là buồng đếm , việc đếm vi sinh vật được thực hiện trong buồng đếm. Đĩa đếm máu được minh họa trong Hình VIII-1.
Thang đo của buồng đếm thường có hai kích thước, một kích thước trong đó một hình vuông lớn được chia thành 16 hình vuông vừa, mỗi hình vuông được chia thành 25 hình vuông nhỏ (Hình VIII-2) và kích thước còn lại là một hình vuông lớn được chia thành 25 hình vuông vừa, mỗi hình vuông được chia thành 16 hình vuông nhỏ (Hình VIII-1, C). Tuy nhiên, số lượng ô vuông nhỏ trong mỗi ô vuông lớn là như nhau đối với cả hai kích thước của bảng đếm, tức là 16 × 25=400 ô vuông nhỏ, như trong Hình VIII-2.
Chiều dài cạnh của mỗi hình vuông lớn là 1 mm, do đó diện tích của mỗi hình vuông lớn là 1 mm2, và sau khi phủ lá kính, chiều cao giữa lá kính và lá kính là 0,1 mm, do đó thể tích của hình vuông buồng đếm là 0,1 mm3.
Khi đếm, thường đếm tổng số vi khuẩn trong năm ô vuông ở giữa, sau đó lấy giá trị trung bình của mỗi ô vuông ở giữa, sau đó nhân với 16 hoặc 25 để có tổng số vi khuẩn trong một ô vuông lớn, sau đó chuyển đổi thành tổng số vi khuẩn có trong 1ml dung dịch vi khuẩn.
