(Sự khác biệt giữa kính hiển vi huỳnh quang (hai photon, đồng tiêu) và kính hiển vi thông thường
Kính hiển vi huỳnh quang là việc sử dụng tia cực tím làm nguồn sáng, dùng để chiếu xạ vật thể cần kiểm tra, để vật thể phát ra nguồn sáng, sau đó việc quan sát vật thể được thực hiện dưới kính hiển vi. Nó chủ yếu được sử dụng cho các tế bào miễn dịch huỳnh quang, chủ yếu bao gồm nguồn sáng, hệ thống tấm lọc và hệ thống quang học để quan sát hình ảnh huỳnh quang của các mẫu thông qua độ phóng đại của thị kính và thấu kính vật kính. Chúng ta hãy xem kính hiển vi huỳnh quang và kính hiển vi quang học thông thường có những điểm khác biệt nào.
1, ở chế độ chiếu sáng
Sự chiếu sáng của kính hiển vi huỳnh quang nói chung là theo kiểu rơi, nghĩa là nguồn sáng đi qua thấu kính vật kính để đưa vào mẫu thử.
2, trong nghị quyết
Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng ánh sáng cực tím làm nguồn sáng, bước sóng tương đối ngắn nhưng độ phân giải cao hơn kính hiển vi quang học thông thường.
3, sự khác biệt trong bộ lọc
Kính hiển vi huỳnh quang là sử dụng hai bộ lọc đặc biệt, phía trước nguồn sáng dùng để lọc ánh sáng khả kiến, giữa vật kính và thị kính để lọc tia cực tím, có thể bảo vệ mắt người.
Kính hiển vi huỳnh quang cũng thuộc một loại kính hiển vi quang học, chủ yếu là kính hiển vi huỳnh quang có bước sóng kích thích ngắn, do đó, điều này dẫn đến việc xây dựng và sử dụng các cấu trúc linh tinh của kính hiển vi huỳnh quang và kính hiển vi thông thường khác nhau, kính hiển vi huỳnh quang hầu hết đều có chức năng thu ánh sáng yếu tốt, vì vậy trong huỳnh quang cực kỳ yếu nên khả năng chụp ảnh tốt. Cùng với sự cải tiến liên tục của kính hiển vi huỳnh quang trong những năm gần đây, tiếng ồn cũng giảm đi rất nhiều. Vì vậy, ngày càng có nhiều kính hiển vi huỳnh quang được ứng dụng.
Kính hiển vi huỳnh quang hai photon có nhiều ưu điểm:
(1) Ánh sáng có bước sóng dài hơn ít bị ảnh hưởng bởi sự tán xạ hơn ánh sáng có bước sóng ngắn dễ dàng xuyên qua mẫu vật;
(2) Các phân tử huỳnh quang bên ngoài mặt phẳng tiêu cự không bị kích thích để có nhiều ánh sáng kích thích tới mặt phẳng tiêu cự hơn, do đó ánh sáng kích thích có thể xuyên sâu hơn vào mẫu vật;
3) Ánh sáng cận hồng ngoại có bước sóng dài hơn ít gây độc cho tế bào hơn ánh sáng có bước sóng ngắn hơn;
4) Khi sử dụng kính hiển vi hai photon để quan sát mẫu vật, hiện tượng tẩy trắng và nhiễm độc quang chỉ xuất hiện ở mặt phẳng tiêu điểm. Do đó, kính hiển vi hai photon phù hợp hơn kính hiển vi đơn photon để quan sát các mẫu vật dày, quan sát tế bào sống hoặc để tiến hành các thí nghiệm tẩy trắng điểm.
