Sự khác biệt, ưu điểm và nhược điểm giữa kính hiển vi huỳnh quang truyền qua và kính hiển vi huỳnh quang phản xạ
1. Kính hiển vi huỳnh quang truyền qua: Nguồn sáng kích thích được truyền qua vật liệu mẫu qua thiết bị ngưng tụ để kích thích huỳnh quang. Bộ tập trung trường tối thường được sử dụng hoặc bộ tập trung thông thường có thể được sử dụng để điều chỉnh gương phản xạ nhằm chuyển đổi ánh sáng kích thích và ánh sáng bên vào mẫu vật. Đây là một kính hiển vi huỳnh quang tương đối cũ. Ưu điểm của nó là huỳnh quang mạnh ở độ phóng đại thấp, trong khi nhược điểm của nó là huỳnh quang yếu đi khi độ phóng đại ngày càng tăng. Vì vậy, tốt hơn là nên quan sát các vật liệu mẫu lớn hơn.
2. Kính hiển vi huỳnh quang chùm tia rơi: Đây là loại kính hiển vi huỳnh quang mới được phát triển trong thời hiện đại. Không giống như ánh sáng kích thích trước đó, ánh sáng kích thích rơi từ thấu kính vật kính xuống bề mặt mẫu vật, sử dụng cùng một thấu kính vật kính làm thiết bị ngưng tụ chiếu sáng và thấu kính vật kính để thu huỳnh quang. Cần phải thêm một bộ tách chùm tia màu kép vào đường dẫn quang, tạo thành một góc 45 độ với photouranium. Ánh sáng kích thích được phản xạ vào vật kính và tập trung lại trên mẫu. Huỳnh quang do mẫu tạo ra và ánh sáng kích thích phản xạ từ bề mặt của vật kính và kính che đồng thời đi vào vật kính và quay trở lại bộ tách chùm tia màu kép, tách ánh sáng kích thích và huỳnh quang. Ánh sáng kích thích dư sau đó được hấp thụ bởi bộ lọc chặn. Nếu sử dụng các kết hợp khác nhau của bộ lọc kích thích, bộ tách chùm tia màu kép và bộ lọc chặn, chúng có thể đáp ứng nhu cầu của các sản phẩm phản ứng huỳnh quang khác nhau. Ưu điểm của kính hiển vi huỳnh quang này là trường chiếu sáng đồng đều, hình ảnh rõ ràng và huỳnh quang mạnh hơn với độ phóng đại cao hơn.
Ưu điểm và nhược điểm của kính hiển vi huỳnh quang truyền qua
Nguồn sáng: Đèn thủy ngân cao áp hoặc đèn halogen.
Gương tiêu điểm: Sử dụng đèn chiếu trường tối để phân tách kích thích và huỳnh quang.
Vật kính: Có thể sử dụng bất kỳ loại vật kính nào.
Mẫu vật: Mẫu vật mỏng phù hợp hơn cho việc quan sát đường truyền.
Ưu điểm: ① Do sử dụng tụ quang trường tối nên ánh sáng kích thích không thể đi vào thấu kính vật kính, dễ tạo nền tối và đạt độ tương phản tốt, có thể sử dụng bất kỳ thấu kính vật kính nào để quan sát. ② Khi sử dụng vật kính có độ phóng đại thấp, nó sẽ sáng hơn kính hiển vi huỳnh quang phản chiếu.
Nhược điểm: Tâm và chiều cao của đèn chiếu phải được điều chỉnh chính xác, nếu không thì không thể thu được hình ảnh huỳnh quang sáng. Do giới hạn tiêu cự của đèn chiếu trường tối nên không thể sử dụng các tấm kính dày. Vùng chiếu sáng của trường nhìn không được quá lớn, nếu không có thể làm cho màu huỳnh quang của mẫu huỳnh quang bị mờ đi. Mẫu vật dày hoặc đục không phù hợp.
Ưu điểm và nhược điểm của kính hiển vi huỳnh quang phản xạ
Nguồn sáng: Đèn thủy ngân cao áp hoặc đèn halogen.
Thấu kính hội tụ: Vì thấu kính vật kính đóng vai trò là thấu kính hội tụ nên không cần có thấu kính hội tụ.
Thấu kính vật kính: Thấu kính vật kính được sử dụng phải có khả năng truyền đủ ánh sáng cực tím và không tự tạo ra huỳnh quang, không có giới hạn về khẩu độ số.
Mẫu vật: Có thể quan sát được cả mẫu vật dày và mờ đục.
Ưu điểm: ① Vì vật kính cũng đóng vai trò là đèn rọi nên không cần điều chỉnh nhiều. ② Bằng cách sử dụng phương pháp chiếu sáng Kolar, có thể sử dụng hiệu ứng của khẩu độ và khẩu độ trường nhìn. Khẩu độ số của vật kính không bị giới hạn và cũng có thể thu được hình ảnh có độ phân giải cao ở độ phóng đại cao. Mẫu vật dày hoặc mờ đục cũng có thể được được quan sát và cũng có thể sử dụng các tấm phủ dày. Các phương pháp quan sát khác cũng có thể được kết hợp với huỳnh quang phản xạ, đặc biệt là với phương pháp lệch pha và phương pháp giao thoa vi sai truyền. Nó có thể tránh được hiện tượng phai màu huỳnh quang không cần thiết.
Nhược điểm: Khi sử dụng vật kính phóng đại mặt đất, hình ảnh tương đối tối nên phải sử dụng vật kính có khẩu độ số cao. Hệ thống lọc phải tách biệt hiệu quả sự phát quang kích thích và huỳnh quang.,
