Sự khác biệt giữa kính hiển vi huỳnh quang và kính hiển vi đồng tiêu laser
kính hiển vi huỳnh quang
1. Kính hiển vi huỳnh quang sử dụng ánh sáng cực tím làm nguồn sáng, dùng để chiếu xạ vật thể được phát hiện để làm cho nó phát ra huỳnh quang, sau đó quan sát hình dạng và vị trí của vật thể dưới kính hiển vi. Kính hiển vi huỳnh quang được sử dụng để nghiên cứu sự hấp thụ, vận chuyển, phân bố và vị trí của các chất hóa học trong tế bào. Một số chất trong tế bào như diệp lục có thể phát huỳnh quang sau khi được chiếu tia cực tím; Các chất khác không thể tự phát huỳnh quang nhưng có thể phát huỳnh quang sau khi được nhuộm bằng thuốc nhuộm huỳnh quang hoặc kháng thể huỳnh quang và chiếu xạ bởi tia cực tím. Kính hiển vi huỳnh quang là một trong những công cụ nghiên cứu định tính và định lượng các chất này.
2, nguyên lý kính hiển vi huỳnh quang:
(a) Nguồn sáng: Nguồn sáng phát ra ánh sáng có bước sóng khác nhau (từ tia cực tím đến tia hồng ngoại).
(b) Nguồn sáng của bộ lọc kích thích: truyền ánh sáng có bước sóng cụ thể có thể làm cho mẫu phát huỳnh quang, đồng thời chặn ánh sáng không có tác dụng đối với huỳnh quang kích thích.
(c) Mẫu vật huỳnh quang: thường được nhuộm bằng chất màu huỳnh quang.
(d) Bộ lọc chặn: chặn ánh sáng kích thích không được mẫu vật hấp thụ để truyền huỳnh quang có chọn lọc và một số bước sóng trong huỳnh quang cũng được truyền đi có chọn lọc. Kính hiển vi sử dụng tia cực tím làm nguồn sáng để làm cho vật được chiếu xạ phát ra huỳnh quang. Kính hiển vi điện tử lần đầu tiên được Knohl và Ha Roska lắp ráp ở Berlin vào năm 1931. Kính hiển vi này sử dụng chùm tia điện tử tốc độ cao thay vì chùm ánh sáng. Do bước sóng của dòng điện tử ngắn hơn nhiều so với bước sóng của sóng ánh sáng nên độ phóng đại của kính hiển vi điện tử có thể đạt tới 8{3}}0 nghìn lần và giới hạn độ phân giải tối thiểu là 0,2 nanomet. Kính hiển vi điện tử quét, bắt đầu được sử dụng vào năm 1963, có thể khiến con người nhìn thấy những cấu trúc cực nhỏ trên bề mặt vật thể.
3. Phạm vi ứng dụng: dùng để phóng to hình ảnh của các vật thể nhỏ. Nó thường được áp dụng để quan sát sinh học, y học và các hạt cực nhỏ.
kính hiển vi đồng tiêu
1. Kính hiển vi đồng tiêu bổ sung thêm một thấu kính bán phản xạ trên đường quang của ánh sáng phản xạ, làm khúc xạ ánh sáng phản xạ truyền qua thấu kính sang các hướng khác. Tại tiêu điểm của nó, có một vách ngăn có lỗ kim và lỗ kim nằm ở tiêu điểm. Đằng sau vách ngăn là một ống nhân quang. Có thể tưởng tượng rằng ánh sáng phản xạ trước và sau tiêu điểm của ánh sáng phát hiện đi qua hệ thống tiêu điểm này và sẽ không tập trung vào lỗ nhỏ mà sẽ bị chặn bởi vách ngăn. Vì vậy quang kế đo cường độ ánh sáng phản xạ tại tiêu điểm.
2. Nguyên tắc: Kính hiển vi quang học truyền thống sử dụng nguồn sáng trường, hình ảnh của từng điểm trên mẫu vật sẽ bị nhiễu xạ hoặc tán xạ ánh sáng của các điểm lân cận; Kính hiển vi đồng tiêu quét laser quét mọi điểm của mặt phẳng tiêu cự trong mẫu vật bằng cách sử dụng nguồn sáng điểm được hình thành bởi chùm tia laser đi qua lỗ kim chiếu sáng. Điểm được chiếu xạ trên mẫu vật được chụp ảnh tại lỗ kim phát hiện, được nhận từng điểm hoặc từng điểm bằng ống nhân quang (PMT) hoặc thiết bị ghép lạnh (cCCD) sau khi phát hiện lỗ kim và hình ảnh huỳnh quang nhanh chóng được hình thành trên màn hình điều khiển máy tính. Lỗ kim chiếu sáng và lỗ kim phát hiện được liên hợp với mặt phẳng tiêu điểm của thấu kính vật kính và các điểm trên mặt phẳng tiêu điểm đồng thời tập trung vào lỗ kim chiếu sáng và lỗ kim phát xạ, và các điểm bên ngoài mặt phẳng tiêu điểm sẽ không được chụp tại lỗ kim phát hiện, sao cho ảnh đồng tiêu thu được là tiết diện quang học của mẫu vật, khắc phục được khuyết điểm ảnh mờ của kính hiển vi thông thường.
3. Lĩnh vực ứng dụng: liên quan đến y học, nghiên cứu động vật và thực vật, hóa sinh, vi khuẩn học, sinh học tế bào, mô và phôi, khoa học thực phẩm, di truyền, dược lý, sinh lý học, quang học, bệnh lý, thực vật học, khoa học thần kinh, sinh học biển, khoa học vật liệu, khoa học điện tử, cơ học, địa chất dầu khí và khoáng vật học.
