So sánh kính hiển vi đồng tiêu và kính hiển vi quang học thông thường
Kính hiển vi là công cụ chính để quan sát tế bào. Tùy thuộc vào nguồn sáng, nó có thể được chia thành hai loại: kính hiển vi quang học và kính hiển vi điện tử. Cái trước sử dụng ánh sáng khả kiến (kính hiển vi cực tím đến tia cực tím) làm nguồn sáng, trong khi cái sau sử dụng chùm tia điện tử làm nguồn sáng. Kính hiển vi quang học thông thường và kính hiển vi đồng tiêu laser thuộc cùng một kính hiển vi quang học.
I. Kính hiển vi quang học tổng quát
Kính hiển vi sinh học thông thường bao gồm ba phần, đó là: ① hệ thống chiếu sáng, bao gồm nguồn sáng và tụ điện; ② hệ thống phóng đại quang học, bao gồm vật kính và thị kính, là phần chính của kính hiển vi, để loại bỏ quang sai hình cầu và quang sai màu, thị kính và vật kính bao gồm một nhóm thấu kính phức tạp; ③ thiết bị cơ khí, dùng để cố định vật liệu và quan sát sự tiện lợi.
Độ rõ của vật kính hiển vi không chỉ được xác định bởi độ phóng đại mà còn bằng khả năng phân giải (độ phân giải) của kính hiển vi, khả năng phân giải đề cập đến kính hiển vi (hoặc mắt người cách mục tiêu 25cm) có thể phân biệt được vật thể zui trong những khoảng nhỏ của khả năng phân biệt độ lớn của khả năng phân giải được xác định bởi bước sóng của ánh sáng và tốc độ miệng gương và chiết suất của môi trường, biểu thị bằng công thức:
R=0.61λ /NANA=nsin /2 trong đó: n=chiết suất của môi trường;=góc miệng gương (mẫu vật trên miệng thấu kính vật kính có góc căng), NA=tỷ lệ miệng gương (khẩu độ số). Góc của miệng gương luôn nhỏ hơn 180?, do đó giá trị zui của sina/2 nhất thiết phải nhỏ hơn 1.
Chiết suất của thủy tinh dùng trong sản xuất thấu kính quang học là 1,65 ~ 1,78, chiết suất của môi trường sử dụng càng gần thủy tinh thì càng tốt. Đối với vật kính khô, môi trường không khí, tốc độ miệng gương thường là 0.05 ~ 0,95; Thấu kính dầu lấy dầu tuyết tùng làm môi trường, tỷ lệ miệng gương có thể gần 1,5.
Bước sóng ánh sáng thông thường là 400~700nm, do đó giá trị công suất phân giải của kính hiển vi sẽ không nhỏ hơn 0,2μm, công suất phân giải của mắt người là 0,2mm, do đó thiết kế chung của độ phóng đại zui của kính hiển vi thường là 1000X.
Thứ hai, kính hiển vi quét đồng tiêu laser
Kính hiển vi quét đồng tiêu laser (kính hiển vi quét đồng tiêu laser), với tia laser làm nguồn sáng quét, từng điểm, từng đường, hình ảnh quét nhanh bề mặt, quét laser và thu thập huỳnh quang của một vật kính chung, điểm lấy nét laser quét khách quan , mà còn tạo ảnh tức thời của điểm đối tượng. Do chùm tia laser có bước sóng ngắn hơn nên chùm tia rất mịn nên kính hiển vi quét laser đồng tiêu có độ phân giải cao, gấp khoảng 3 lần so với kính hiển vi quang học thông thường. Hệ thống được lấy nét một lần và quá trình quét được giới hạn ở một mặt phẳng của mẫu. Khi độ sâu lấy nét không giống nhau, có thể thu được hình ảnh ở các mức độ sâu khác nhau của mẫu và những thông tin hình ảnh này được lưu trữ trong máy tính, thông qua phân tích và mô phỏng máy tính, nó có thể hiển thị cấu trúc ba chiều của mẫu tế bào .
