Kính hiển vi sinh học trên thể tích khối mô
Nội soi sinh học Cho đến nay, cố định lạnh bằng đá, cắt lát siêu mỏng đông lạnh và thao tác khô đông lạnh là các phương pháp thông thường đối với trường vi tia X của mô và tế bào. Chi tiết của phương pháp được giải thích ở các điểm sau:
Kính hiển vi sinh học Kính hiển vi có thấu kính ngưng tụ có thể được di chuyển lên xuống để đạt được độ sáng vừa phải hoặc có thể thay đổi khẩu độ của thiết bị mở rộng ánh sáng thay đổi để đạt được độ sáng vừa phải 9b. Nếu ánh sáng nắng, phạm vi phát hiện có thể được nâng lên một cách thích hợp và khẩu độ của ánh sáng thay đổi có thể được mở rộng một cách thích hợp. Nếu ánh sáng quá mạnh thì có thể điều chỉnh gương chiếu hậu xuống phù hợp, khẩu độ của đèn có thể thay đổi để giảm thích hợp. Nếu trong trường hợp này vẫn cảm thấy chói mắt thì bạn có thể chọn bộ lọc thích hợp đặt trong giá đỡ dưới đèn chiếu. Điều này có thể đạt được để làm bạn hài lòng với độ sáng. Tất nhiên, việc điều chỉnh vị trí trên và dưới của thấu kính tụ quang có thể thay đổi kích thước khẩu độ của chỉ số ánh sáng và lựa chọn bộ lọc phù hợp, nghĩa là sau một thời gian thực hành và kinh nghiệm nhất định.
Kính hiển vi sinh học Một vấn đề rất quan trọng là trong quá trình lấy mẫu và tách tế bào, đông khô và nhúng nhựa (FD) sau khi đông lạnh siêu tập sách, đông khô sau khi chạy mịn từng phần trong hàm lượng 65 thành phần nguyên tố phải được được xử lý rất cẩn thận và không được làm hỏng các tế bào cần quan sát và phân tích. Bởi vì phân tích vi vùng bằng tia X không chỉ có nhiều bước mà chi phí còn rất cao, nếu sau một thời gian dài và nhiều bước xử lý, tế bào được phân tích là tế bào hư hỏng hoặc tế bào chết thì sẽ đưa ra kết luận sai. là rất đáng tiếc. Ví dụ, các tế bào cơ tim được phân lập bằng phương pháp xử lý collagenase có hai hình thái, một hình que dài và hình kia là hình tròn. Loại thứ hai là các tế bào sắp chết bị hư hỏng trong quá trình phân lập tế bào.
Nội soi sinh học Hàm lượng và sự phân bố chất điện giải trong hai loại tế bào này rất khác nhau. Na rất cao và K rất thấp trong tế bào cơ tim tròn và nồng độ ca rất cao trong ty thể. Sau khi kiểm tra bằng các phương pháp phân tích khác, người ta thấy rằng hàm lượng Na cao và K thấp trong tế bào hình tròn và lượng ca cao trong ty thể là kết quả của sự tổn thương màng tế bào trong quá trình phân tách tế bào. Việc cố định lạnh các tế bào và mô thường được thực hiện bằng cách cố định dập tắt sau đó bảo quản trong nitơ lỏng. Việc cố định chất làm nguội rất quan trọng đối với hiệu quả của việc bảo quản. Tế bào sống hoặc mô tươi rất giàu nước, khi làm nguội thường tế bào hoặc mô và tác nhân lạnh (đặc biệt là với nitơ lỏng nguyên chất lạnh) tiếp xúc trực tiếp với các bộ phận của quá trình cố định đông lạnh đầu tiên, do đó tạo thành một "vỏ", trong đó ngăn cản sự cố định lạnh ở trung tâm tế bào. Kết quả là, các tinh thể băng thường được tìm thấy ở trung tâm của các tế bào lớn hơn trong quá trình phân tích tế bào vi mô bằng tia X. Để ngăn điều này xảy ra, các chất có điểm nóng chảy cao hơn nitơ lỏng nhưng thấp hơn 806c khô được sử dụng làm chất làm mát. Có nhiều chất như vậy, nhưng * dễ thu được, rẻ tiền là propan đậm đặc (nhiệt độ sôi 42,120c, nhiệt độ nóng chảy 187,10c, trọng lượng phân tử 44,1), tốc độ làm nguội * nhanh. Tuy nhiên nó có nhược điểm là dễ cháy.
Kính hiển vi sinh học có thể được đặt trên một sợi cơ đặc biệt, do đó cần phải cố định sự co rút của sợi cơ để đạt đến một giai đoạn thời gian nhất định, ngay lập tức khởi động vòi phun, để propan lỏng chảy vào sợi cơ, để dập tắt cái lạnh đã cố định. Sau đó, sợi cơ được lấy ra cùng với giá và đưa vào nitơ lỏng. Nếu cố định tế bào máu hoặc tế bào biệt lập, đầu tiên ly tâm tốc độ thấp để làm cô đặc tế bào, tế bào sẽ được chuyển sang ống bạc dẫn nhiệt tốt, ống vào thân thịt propan lỏng cố định lạnh. Phòng thí nghiệm Hall cố định tuyến tụy của chuột, hai miếng thép đầu tiên được làm lạnh trước bằng helium lỏng (hoặc nitơ lỏng), có kẹp kẹp hai miếng đồng sẽ được đặt ở phía trước và phía sau tuyến tụy, để dì của tuyến làm nguội cố định lạnh. Các mô hoặc tế bào có thể được lưu trữ trong nitơ lỏng trong một thời gian dài sau khi làm nguội và cố định.
