Ưu điểm và nhược điểm của Kính hiển vi quét Laser đa photon (MLSM)
Kính hiển vi quét laser đa photon là phương pháp thử nghiệm dựa trên công nghệ kính hiển vi quét laser, mang lại khả năng phân cắt quang học tốt hơn cho quan sát ba chiều. Phương pháp kích thích huỳnh quang đa photon sử dụng ánh sáng đỏ có bước sóng dài hoặc ánh sáng cận hồng ngoại để thu thập hình ảnh huỳnh quang có độ phân giải cao của mẫu vật, gây thiệt hại tối thiểu cho mẫu vật sống. Vì vậy, nó phù hợp để chụp ảnh tế bào sống, đặc biệt là các mô sống dày như lát não, phôi, v.v. Nghiên cứu hình ảnh của toàn bộ cơ quan hoặc thậm chí toàn bộ cơ thể.
Những lợi thế như sau:
1. Sử dụng ánh sáng đỏ hoặc ánh sáng hồng ngoại để kích thích và độ tán xạ ánh sáng nhỏ (sự tán xạ của các hạt nhỏ tỷ lệ nghịch với lũy thừa thứ tư của bước sóng).
2. Không cần lỗ kim và có thể thu thập được nhiều photon tán xạ hơn từ mặt cắt hình ảnh.
3. Lỗ kim không thể phân biệt các photon tán xạ phát ra từ vùng mất nét hoặc vùng lấy nét và tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu của hình ảnh nhiều photon trong các lớp sâu là tốt.
4. Ánh sáng cực tím hoặc ánh sáng khả kiến dùng để kích thích đơn photon dễ bị mẫu hấp thụ và suy giảm trước khi chùm tia tới mặt phẳng tiêu cự và khó kích thích các lớp sâu.
5. Khi quan sát bằng kính hiển vi sinh học, điều cần cân nhắc đầu tiên là không làm tổn hại đến trạng thái hoạt động của chính sinh vật và duy trì dòng nước, nồng độ ion, oxy và chất dinh dưỡng. Trong trường hợp quan sát bằng ánh sáng, cả nhiệt lượng và năng lượng photon đều phải nằm trong lượng chiếu xạ và năng lượng ánh sáng thì tế bào mới không bị hư hại.
6. Kính hiển vi đa photon cũng có nhiều ưu điểm. Ví dụ, về độ phân giải ba chiều, khả năng xuyên sâu, hiệu suất tán xạ, ánh sáng nền, tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu, khả năng điều khiển, v.v., có những đặc điểm siêu việt mà các kính hiển vi laser trước đây không có hoặc không thể sánh được.
Kính hiển vi quét laser đồng tiêu đa photon đã được mở rộng sang các lĩnh vực nghiên cứu và ứng dụng khác nhau. Nó có thể tiến hành quan sát không phá hủy ba chiều các mẫu ở trạng thái tự nhiên và có thể cải thiện độ phân giải cũng như tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu của hệ thống. Sử dụng vật liệu kích thích đa photon Những thay đổi về tính chất cũng có thể thực hiện việc lưu trữ dữ liệu chiều cao ba chiều và gia công vi mô ba chiều theo bất kỳ hướng nào, có giá trị ứng dụng cao. Người ta tin rằng với sự phát triển hơn nữa của máy móc, vật liệu, công nghệ laser, v.v. liên quan đến kính hiển vi đồng tiêu đa photon, nhiều kính hiển vi quét laser đồng tiêu Photonic sẽ nhận được sự phát triển lớn hơn và ứng dụng rộng rãi hơn.
Những nhược điểm như sau:
1. Nó chỉ có thể chụp ảnh huỳnh quang.
2. Nếu mẫu chứa các chất mang màu có thể hấp thụ ánh sáng kích thích, chẳng hạn như sắc tố, thì mẫu có thể bị hỏng do nhiệt.
3. Độ phân giải giảm đi một chút. Mặc dù có thể cải thiện bằng cách sử dụng đồng thời các lỗ đồng tiêu nhưng sẽ xảy ra hiện tượng mất tín hiệu.
4. Bị giới hạn bởi tia laser cực nhanh đắt tiền, giá thành của kính hiển vi quét đa photon tương đối cao.
