Điều chỉnh hệ thống đường quang hình ảnh của kính hiển vi ánh sáng và phác thảo kiểm tra bằng kính hiển vi
Điều chỉnh hệ thống đường quang hình ảnh và phác thảo kiểm tra bằng kính hiển vi
Việc điều chỉnh hệ thống quang học hình ảnh của kính hiển vi được thực hiện theo nhu cầu của các kỹ thuật kính hiển vi khác nhau. Tóm lại, cái gọi là kính hiển vi là phương pháp chiếu sáng được sử dụng khi quan sát mẫu qua kính hiển vi, cũng như kỹ thuật và phương pháp thu được độ tương phản tốt hơn trong hình ảnh được tạo bởi mẫu. Sau đây mô tả ngắn gọn kính hiển vi đã trưởng thành trong một số phương pháp và phương pháp điều chỉnh hệ thống quang học hình ảnh kính hiển vi tương ứng.
1. Trường sáng truyền:
Đây là phương pháp ứng dụng truyền thống và phổ biến nhất kể từ khi phát minh ra kính hiển vi. Các thành phần cơ bản: a. Thấu kính vật kính: bất kỳ thấu kính vật kính nào cũng có thể được sử dụng để quan sát trường sáng; b. Ống ngắm: có thể sử dụng tất cả các loại ống ngắm, tốt nhất nên trang bị màng chắn khẩu độ. Phương pháp điều chỉnh: Sau khi điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kuhler của kính hiển vi trên, có thể áp dụng phương pháp trường sáng. Phạm vi áp dụng: tất cả các phần mô bị ố, vết máu, v.v. Biện pháp phòng ngừa: a. Khi sử dụng phương pháp quan sát trường sáng phải điều chỉnh hệ thống chiếu sáng Kuhler; b. Không được mở màng chắn của trường nhìn một cách tùy tiện và thấu kính phía trước của gương tụ quang phải được đặt tương ứng ra ngoài và đi vào đường quang khi sử dụng thấu kính vật kính 10×, nhỏ hơn 10× và lớn hơn 10 ×; c. Không nên sử dụng màng chắn khẩu độ của gương tụ quang để điều chỉnh độ sáng của trường nhìn và không được điều chỉnh độ cao của gương tụ quang một cách bừa bãi, nếu không độ phân giải của kính hiển vi sẽ bị hạ xuống và độ phân giải của mô bị ố. sẽ bị hư hỏng. độ phân giải của kính hiển vi và hư hỏng đã được điều chỉnh cho hệ thống chiếu sáng Kuhler; d. đối với ảnh vi mô, mỗi thay đổi trong việc sử dụng độ phóng đại của thấu kính vật kính, bạn phải điều chỉnh màng chắn khẩu độ của thấu kính tụ quang sao cho kích thước của nó bằng đúng với khẩu độ số được sử dụng trong thấu kính vật kính là 2/3.
2. Phương pháp tương phản pha ánh sáng truyền qua:
Đây là một phương pháp kiểm tra bằng kính hiển vi hiện đại về phương pháp tăng cường độ tương phản. Các thành phần cơ bản: vật kính tương phản pha, trường nhìn sáng và phạm vi phát hiện đa năng tương phản pha, kính viễn vọng lấy nét, bộ lọc màu xanh lá cây.
Phương pháp điều chỉnh:
Một. Dựa trên sự điều chỉnh của hệ thống chiếu sáng Kuhler, lấy nét mẫu rõ ràng bằng phương pháp trường sáng
b. Xoay phạm vi quan sát sang Ph1 để căn chỉnh vị trí thang đo quay số, chọn vật kính tương phản pha 10 × và thay thế mẫu trong suốt cần quan sát.
c. Rút phích cắm một trong các thị kính, thay thế bằng kính thiên văn ở giữa và tập trung vào hai vòng tương phản pha trong trường nhìn (vòng tương phản pha màu đen của thấu kính vật kính và vòng tương phản pha truyền ánh sáng của thấu kính tụ quang).
d. Hai vòng tương phản pha trong trường nhìn có thể không nhất thiết trùng nhau, hãy điều chỉnh hai thiết bị điều chỉnh trên phạm vi đo điểm (điều chỉnh vị trí bên trái và bên phải của cần điều chỉnh vòng tương phản pha và điều chỉnh vị trí phía trước và phía sau của núm ma sát) , sao cho vòng truyền ánh sáng cho mặt trước và mặt sau bên phải và bên trái trùng với vòng màu đen
đ. Sau khi hiệu chỉnh xong, quay trở lại thị kính để quan sát và ấn bộ lọc màu xanh lá cây vào đường dẫn quang để quan sát hình ảnh tương phản pha của mẫu.
f. Khi có vật kính 20× và 40× để quan sát thì đặt thấu kính đốm ở vị trí Ph2, khi sử dụng thấu kính mục tiêu 100× thì đặt thấu kính đốm ở vị trí Ph3.
Phạm vi ứng dụng: Nó phù hợp để quan sát các mẫu trong suốt, không nhuộm màu hoặc không nhuộm màu, chẳng hạn như tất cả các loại tế bào, mô sống, các phần mô không nhuộm màu hoặc không nhuộm màu, sinh vật dưới nước, v.v.
3. Phương pháp tương phản pha giao thoa vi phân:
Để khắc phục phương pháp tương phản pha, việc quan sát các chi tiết mẫu xung quanh hình ảnh kèm theo quầng sáng sẽ che đi các chi tiết lẽ ra phải nhìn thấy, cũng như các mẫu hoặc phần mô yêu cầu độ dày khá mỏng, về nguyên tắc, có thể dày hơn 10?m và các hạn chế khác, việc sử dụng nguyên lý giao thoa chùm tia kép để thiết kế phương pháp tương phản pha giao thoa vi sai phụ.
Phương pháp điều chỉnh:
Một. Phương pháp DIC phải được điều chỉnh trên cơ sở hệ thống Kulemin đã được điều chỉnh
b. Sử dụng vật kính 10×, xác định vị trí lấy nét của vật kính để có thể nhìn rõ mẫu với trường nhìn sáng.
c. Đặt bộ phân cực vào đường chiếu sáng, lưu ý rằng nó phải được định hướng theo hướng đông-tây.
d. Xoay nút xoay tụ quang tới vị trí tương ứng với việc sử dụng thấu kính vật kính 10 ×, tức là DIC 0.3-0.4.
đ. Chèn thanh trượt DIC cho thấu kính vật kính 10× ở phía sau thấu kính vật kính hoặc trên bộ chuyển đổi vật kính.
f. Lắp máy phân tích vào đường quang hình ảnh và lưu ý rằng hướng của nó phải là hướng nam-bắc.
g. Thay mẫu trong suốt cần quan sát, bật nguồn sáng để lấy nét mẫu rõ ràng.
h. Điều chỉnh bộ chèn DIC sao cho hình ảnh tương phản nhiễu vi phân đạt được hiệu quả tốt nhất, tức là hiệu ứng giảm nhẹ rõ ràng nhất.
Tôi. Đồng thời, điều chỉnh màng chắn khẩu độ của gương tụ quang để hiệu ứng tương phản cũng được tối ưu.
j. Sau đó tinh chỉnh chi tiết mẫu để xem cấu trúc của mẫu ở các cấp độ khác nhau.
k. Nếu màu bổ sung (tấm hãm màu đỏ bậc nhất) được lắp vào và bộ chèn DIC được điều chỉnh cùng lúc, có thể nhìn thấy các màu rực rỡ luôn thay đổi trong trường nhìn, với màu đỏ, cam, vàng, lục, lam, tím, hồng, hồng tím và vàng vàng. Phạm vi áp dụng: các phần mô trong suốt hoặc không bền, độ dày lên tới khoảng 100?m, mô sống và tế bào sống trong nuôi cấy, các sinh vật sống nhỏ, v.v.
